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Invitrogen™ Kit de ELISA para AKT1 (fosforilada) [pS473] humana ultrasensible

Código de producto. 10642644
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Cantidad:
96 pruebas
Tamaño de la unidad:
96 tests
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Marca: Invitrogen™ KHO0541

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Includes

Placa de 96 pocillos recubiertos de anticuerpos para AKT; patrón de AKT [pS473]; tampón diluyente estándar; anticuerpo de detección de AKT [pS473]; IgG-HRP anticonejo (100X); diluyente de HRP; concentrado de tampón de lavado (25X); cromógeno estabilizado, TMB; solución de parada; cubiertas de placa; protocolo detallado con pruebas de validación

Kit de ELISA tipo sándwich de alta sensibilidad

El kit está diseñado para detectar y cuantificar el nivel de AKT1 (fosforilado) [pS473] en lisados de células humanas frescos o congelados. Se ha observado reactividad cruzada en células de ratón y rata. El ensayo reconoce el AKT1 (fosforilado) [pS473] tanto natural como recombinante. Principio del método Se ha recubierto un ac de captura monoclonal específico para AKT1 (fosforilada) [pS473] en los pocillos de la placa de 96. Durante la primera incubación, los patrones y las muestras se pipetan en los pocillos y el antígeno se une al ac inmovilizado (captura). Después del lavado, se añade a los pocillos un ac de conejo específico para la proteína objetivo y sirve como ac de detección al unirse a la proteína inmovilizada capturada durante la primera incubación. Después del lavado, se añade un IgG anticonejo etiquetado con peroxidasa de rábano picante. Esto se une al ac de detección para completar la estructura tipo sandwich. Después de una tercera incubación y lavado de la enzima no ligada, se añade una solución de sustrato (TMB), sobre la que actúa la enzima unida para producir color. La intensidad de este producto coloreado es directamente proporcional a la concentración de proteína objetivo presente en la muestra original y la densidad óptica puede leerse en un lector de microplacas estándar. Validación rigurosa Cada lote ELISA se somete a pruebas de calidad como sensibilidad, especificidad y consistencia entre lotes. Consulte el manual para la validación.

La proteína quinasa serina-treonina codificada por el gen AKT1 es catalíticamente inactiva en fibroblastos primarios inmortalizados y privados de suero. AKT1 y AKT2 relacionada se activan por el factor de crecimiento derivado de las plaquetas. La activación es rápida y específica, y es frenada por mutaciones en el dominio de homología de pleckstrina de AKT1. Se demostró que la activación se produce a través de la fosfatidilinositol 3-quinasa. En el sistema nervioso en desarrollo, AKT es un mediador crítico de la supervivencia neuronal inducida por el factor de crecimiento. Los factores de supervivencia pueden suprimir la apoptosis de manera independiente de la transcripción activando la serina/treonina quinasa AKT1, que luego realiza el fosforilado de los componentes de la maquinaria apoptótica y los inactiva. Las mutaciones en este gen se han asociado con el síndrome de Proteus. Se han encontrado múltiples variantes de transcripción con empalme alternativo para este gen. [proporcionado por RefSeq, julio de 2011]

Información de órdenes

Condición de envío: Hielo húmedo

TRUSTED_SUSTAINABILITY

Especificaciones

Número de acceso P31749,P31750,P47196
Intervalo del ensayo 0,39-25 U/ml
Sensibilidad del ensayo 0,2 U/ml
Concentración De 0,3 a 25 U/ml
Conjugado Peroxidasa de rábano picante (HRP)
Tipo de producto Kit de ELISA
Tipo de muestra Lisados celulares
Tipo de sustrato Serina/treonina quinasa
Especies diana Humano, ratón, rata
Para utilizar con (equipo) Lector de microplacas colorimétrico
ID de gen (Entrez) 11651, 207, 24185
Símbolo de gen AKT,CWS6,PKB,PKB-ALPHA,PRKBA,RAC,RAC-ALPHA
Tiempo de incubación 4 h
CV interensayo 5,2 %
CV intraensayo 4,7%
Contenido del kit Placa de 96 pocillos recubiertos previamente, Estándar, Tampón de dilución estándar, Anticuerpo de detección, anticonejo-HRP, Diluyente HRP, Tampón de lavado, Cromógeno, Solución de parada, Cubiertas adhesivas para placas
Etiqueta o tinte Peroxidasa de rábano picante (HRP)
Gen marcador Akt1
Cantidad 96 pruebas
Estado normativo RUO
Volumen de muestra Lisado celular, 10 μL
Requisitos de almacenamiento De 2 °C a 8 °C
Objetivo Humano, ratón, rata
Tiempo de prueba 1 h 20 min
Tiempo total del ensayo 4 h
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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

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