Invitrogen™ NovaBright™ Phospha-Light™ EXP Assay Kit for SEAP (Secreted Placental Alkaline Phosphatase) Reporter Gene Detection

La detección sensible de la enzima indicadora de fosfatasa alcalina permite llevar a cabo un gran número de aplicaciones en muchas áreas de investigación de las ciencias de la vida, incluidos los ensayos de la función viral, la expresión génica, el desarrollo de vacunas, el desarrollo de vectores virales y de métodos de administración de genes para terapia génica, monitoreo de expresión génica «in vivo» y nuevos ensayos funcionales celulares. Este ensayo de SEAP es uno de los métodos más fáciles y rápidos para optimizar la eficacia de la transfección. Este ensayo se ha utilizado para una amplia variedad de ensayos funcionales virales, incluidos los ensayos de expresión génica viral, replicación viral, fugenicidad viral, neutralización vírica y fusión celular mediada por virus, e infectividad viral. El uso de la proteína indicadora SEAP es ideal para los ensayos in vivo de gen indicador, mediante el análisis de muestras de suero de animales transgénicas, transfectados o infectados por vectores virales. El sistema de ensayo de gen indicador NovaBright se ha utilizado para medir los niveles de SEAP en sueros de animales enteros transgénicos o transfectados, incluidos sueros de ratón, rata, marmoset, mono y cerdo, y en líquido de alantoína de huevo de gallina. La proteína SEAP de ratón (mSEAP) se ha desarrollado recientemente para mejorar la estabilidad de la proteína SEAP en ratones transgénicos, y el ensayo de SEAP NovaBright se ha utilizado para la detección sensible de mSEAP. Además de las aplicaciones del gen indicador (expresión génica), el sistema de ensayo se utiliza para medir la SEAP como indicadora funcional para ensayos de unión receptor-ligando con una quimera SEAP-ligando, producto de una secreción mediada por proteasa, y para la actividad de la vía de secreción. El sistema de ensayo NovaBright puede utilizarse como biomarcador para la medición celular de la fosfatasa alcalina no placentaria.

Este kit proporciona un procedimiento mucho más sencillo que otros ensayos. El ensayo es homogéneo y solo requiere dos soluciones, ambas listas para su uso. La cinética prolongada de emisión de brillo proporciona una señal de luz estable para mayor flexibilidad en bel tiempo de lectura. La señal del ensayo se mide con un luminómetro simple sin inyectores. La SEAP es una proteína indicadora que se secreta en el medio de cultivo celular y se detecta mediante pruebas de alícuotas del medio. Dado que la SEAP se libera en el medio, la lisis celular es innecesaria. No obstante, el ensayo también permite la detección de la isoenzima fosfatasa alcalina placentaria (PLAP) después de la lisis celular.

• Ensayo de genes indicadores quimioluminiscentes de segunda generación
• Protocolo sencillo, rápido y compatible con los métodos de alto rendimiento
• Detección ultrasensible de fosfatasa alcalina placentaria secretada
• Compatibilidad con plataformas automatizadas con soluciones/posiciones de activación ya existentes

• Método de detección: Quimioluminiscente
• Para utilizar con el equipo: Luminómetro (microplaca)
• Formato: Placa de 96 pocillos
• Compatibilidad de alto rendimiento: Compatible con alto rendimiento
• Presentación de datos: Extremo
• Sustrato: CSPD
• Propiedades de sustrato: Sustrato químico
• Tipo de sustrato: Sustrato de AP (fosfatasa alcalina)
• Enzima diana: Fosfatasa alcalina placentaria