Thermo Scientific™ NcoI (10 U/μL)

5'...C▵C A T G G...3'

3'...G G T A C▵C...5'

Condiciones para una actividad del 100 %:

• 1X tampón Tango: 33 mM de Tris-acetato (pH 7.9 a 37 °C), 10 mM de Mg-acetato, 66 mM de K-acetato y 0,1 mg/ml de BSA
• Incubar a 37 °C

Tampón de almacenamiento:

• NcoI se suministra en: 10 mm de Tris-HCl (pH de 7,5 a 25 °C), 50 mm de KCl, 1 mm de DTT, 0,1 mm de EDTA, 0,2 mg/ml de BSA y 50 % (v/v) de glicerol

Ligadura y redisociación:

• Después de una sobredigestión 50 mayor con Ncol, más del 95 % de los fragmentos de ADN se pueden ligar y recortar

Efectos de metilación:

• Dam: nunca se solapa, sin efecto
• Dcm: nunca se solapa, sin efecto
• CpG: nunca se solapa, sin efecto
• EcoKI: nunca se solapa, sin efecto
• EcoBI: nunca se solapa, sin efecto

Digestión del ADN integrado en agarosa:

• Se requieren como mínimo 5 unidades de la enzima para la digestión completa de 1 μg de ADN lambda integrado en agarosa en 16 horas

Extremos compatibles:

• AflIII, PscI, BtgI, Eco130I, FatI, PagI

Nota:

La concentración baja de sales, la concentración alta de glicerol (>5 %), un pH>8.0 o un gran exceso de la enzima pueden producir actividad estrella (star activity).