Learn More
Invitrogen™ Kit de captura de ARN Click-iT™ Nascent, para análisis de expresión génica
Descripción
Includes
Componente A: 1 x 5 mg de 5-etinil uridina (EU); componente B: 1 x 1 ml de tampón Click-iT EU 2X concentrado; componente C: 1 x 340 μg de biotina acida (PEG4 carboxamida-6-azidohexanilo biotina); componente D: 1 x 200 μl de sulfato de cobre (II) (CuSO 4), 25 mM de solución acuosa; componente E: 1 x 400 mg de aditivo 1 de tampón de reacción Click-iT; componente F: 1 x 100 μl de aditivo 2 de tampón de reacción Click-iT; componente G: 2 x 1 ml de tampón de unión de ARN Click-iT (concentrado 2X); componente H: 1 x 500 μl de estreptavidina T1 Dynabeads™ MyOne™; componente I: 1 x 35 ml de tampón de lavado de reacción 1 Click-iT; componente J: 1 x 35 ml de tampón de lavado de reacción 2 Click-iT™
El kit de captura de ARN naciente Click-iT utiliza nuestra química Click-iT patentada para capturar con alta eficacia y sensibilidad ARN recién creado. Con el enfoque de Click-iT se pueden realizar estudios sobre análisis de alta resolución de la regulación génica junto con la regulación del ARN, la estabilidad del ARN, la síntesis de ARN, la decadencia y la degradación del ARN, la regulación transcripcional, los ensayos delta/delta C(t), los ensayos nucleares run on/run off, etc. Los homólogos de etileno uridina (EU) ribonucleótidos que contienen un grupo reactivo a alquinos se introducen en las células o los tejidos. Una vez incorporados, las células se lisan y el ARN se aísla. La biotina azida se somete a química clic y, a continuación, se usan gránulos magnéticos de estreptavidina para capturar el nuevo grupo de ARN sintetizado. Los ARN capturados se amplifican y los ADNc resultantes se usan en varias metodologías posteriores a la captura. Lo hemos validado para matrices (tanto de alta densidad como de baja densidad), secuenciación en análisis delta CT mediante qPCR basada en SOLiD™ y SYBR™ o TaqMan™. Solo se necesitan 25.000 células para el análisis de las nuevas transcripciones inducidas. El kit permite 40 condiciones para etiquetado y captura que se pueden dividir en 400 ensayos analíticos individuales. Con un precio de alrededor de un dólar por ensayo, es perfecto para los investigadores de entornos académicos e industriales. Las células toleran bien el reactivo EU en la concentración recomendada de 200 μM. En una pantalla de matriz de más de 32.000 genes solo se podrían detectar los cambios más leves en 12, en comparación con un vehículo de control. Además, en la primera concentración de alimentación, cinco veces la recomendada (200 μM frente a 1,0 mM), no hubo efectos sobre un grupo de genes de mantenimiento ni en la capacidad de las células para proliferar normalmente. Se confirmó la sensibilidad y la fiabilidad en una matriz de densidad baja (TLDA™) de genes apoptóticos. El grupo emergente capturado detectó de manera exacta todas las transcripciones apoptóticas (inducidas por estaurosporina) caracterizadas anteriormente sin ningún cambio perceptible en la información de secuencia.
- Menos peligroso
Descubrimiento, no solo recuperación. En las últimas décadas, los esfuerzos genómicos han revelado que solo el 2 % del genoma humano codifica proteínas, lo que deja al 98 % sin información genética. Este nuevo enfoque ayudará notablemente en la transcriptómica de esta década a descubrir la finalidad y los patrones de expresión de este amplio contenedor de secuencias desconocidas.
Química clic, purificación y análisis de ADN y ARN, análisis de expresión génica y genotipado, etiquetado químico, análisis de micromatrices, detección y captura de ARN naciente con química clic, etiquetado de ácidos nucleicos y síntesis de oligos, aislamiento de ARN para micromatrices de expresión, etiquetado de ARN
Información de órdenes
Condición de envío: Hielo húmedo
Especificaciones
Especificaciones
| Contenido y almacenamiento | Componente A 1 x 5 mg de 5-etinil uridina (EU) Componente B 1 x 1 ml de tampón EU Click-iT™ *concentrado 2X* Componente C 1 x 340 µg de biotina azida (PEG4 carboxamida-6-azidohexanilo biotina) Componente D 1 x 200 µl de sulfato de cobre (II) (CuSO4) *solución acuosa de 25 mM* Componente E 1 x 400 mg de aditivo 1 de tampón de reacción Click-iT™ Componente F 1 x 100 µl de aditivo 2 de tampón de reacción Click-iT™ Componente G 2 x 1 ml de tampón de unión de ARN Click-iT™ *concentrado 2X* Componente H 1 x 500 µl de estreptavidina T1 Dynabeads™ MyOne™ Componente I 1 x 35 ml de tampón de lavado de reacción 1 Click-iT™ Componente J 1 x 35 ml de tampón de lavado de reacción 2 Click-iT™ Almacenar a 4 grados C |
| Concentración | 2 X (tampón de unión de ARN y tampón de la UE) |
| Formato | Kit |
| Para utilizar con (equipo) | Sistema 7000, sistema 7200, sistema 7300, sistema 7500 Fast, sistema 7500, sistema 7900HT Fast, sistema 7900HT, StepOne™, modo rápido, StepOne™, modo estándar, StepOnePlus™, modo rápido, StepOnePlus™, modo estándar, termociclador Veriti, bioanalizador Agilent 2100, SOLiD™ |
| Características ecológicas | Menos peligroso |
| Tecnología de aislamiento | Gránulo magnético |
| Línea de productos | Click-iT |
| Tipo de producto | Kit de captura de ARN naciente |
| Cantidad | 1 kit |
| Condiciones de envío | Hielo húmedo |
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Proporcione sus comentarios sobre el contenido del producto rellenando el siguiente formulario.