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Descripción
La transcriptasa inversa (RT) Maxima se obtuvo a través de la evolución in vitro de la transcriptasa inversa M-MuLV. La enzima posee una actividad polimerasa dependiente de ARN y dependiente de ADN, así como actividad ARNasa H. La enzima modificada mediante ingeniería genética ofrece una termoestabilidad considerablemente mejorada, resistencia, así como mejores tasas de síntesis en comparación con la transcriptasa inversa M-MuLV natural.
Maxima Reverse Transcriptase es capaz de realizar la síntesis reproducible de ADNc a partir de una amplia variedad de cantidades de entrada de ARN total (de 1 pg a 5 μg) a elevadas temperaturas (de 50 a 65 °C), lo que la convierte en la herramienta ideal para RT-qPCR de dos pasos (consulte los datos complementarios que se proporcionan).
Gracias a su alta termoestabilidad, la enzima Maxima mantiene su completa actividad durante la reacción de transcripción inversa completa, genera los mejores niveles de rendimiento del ADNc y puede sintetizar incluso transcripciones de ARN muy largas de hasta 20 kb (consulte los datos que se proporcionan). La temperatura de reacción se puede aumentar hasta los 65 °C para una transcripción eficiente de las regiones de ARN con una elevada estructura secundaria o para mejorar la especificidad mediante primers específicos del gen. Gracias a su elevada tasa de síntesis, la reacción de la transcriptasa inversa se puede completar en 15-30 min.
La transcriptasa inversa Maxima se es capaz de hacer una síntesis reproducible del ADNc a partir de una amplia variedad de cantidades de entrada de ARN total (de 1 pg a 5 µg) a temperaturas elevadas (entre 50 y 65 °C), lo que hace que esta enzima sea una herramienta ideal para RT-qPCR de dos pasos (ver datos de apoyo).
Gracias a su alta termoestabilidad, la enzima Maxima mantiene la actividad completa durante toda la reacción de transcripción inversa, genera los rendimientos más altos de ADNc, y es capaz de sintetizar incluso transcripciones de ARN muy largas de hasta 20 kb. La temperatura de reacción se puede aumentar hasta los 65 °C para una transcripción eficiente de las regiones de ARN con una elevada estructura secundaria o para mejorar la especificidad mediante primers específicos del gen. Gracias a su elevada tasa de síntesis, la reacción de la transcriptasa inversa se puede completar en 15-30 min.
Aspectos destacados
• Alto rendimiento del ADNc de longitud completa hasta 20 kb
• Activa hasta 65 °C
• Termoestable: activa al 90 % después de la incubación a 50 °C durante 60 min
• Alta sensibilidad: síntesis reproducible del ADNc a partir de una amplia variedad de cantidades de entrada de ARN total (de 1 pg a 5 µg)
• Eficiente: síntesis del ADNc completo en 15-30 min
• Incorpora nucleótidos modificados
Aplicaciones
• RT-PCR de dos pasos
• RT-qPCR de dos pasos
• Síntesis de la primera cadena del ADNc
• Construcción de bibliotecas de ADNc de longitud completa
• Marcado de ADN
• Extensión del cebador
También disponible: Kit de síntesis de ADNc de primera cadena Maxima para RT-qPCR
Especificaciones
Especificaciones
| Concentración | 200 U/μl |
| Contenido y almacenamiento | La transcriptasa inversa Maxima (proporcionada como 2000 unidades a una concentración de 200 U/μl) se suministra con tampón RT 5X (250 mM de Tris-HCl [pH 8,3 a 25 °C], 375 mM de KCl, 15 mM de MgCl2, 50 mM de DTT). Almacenar a - 20 °C. |
| Formato | Stand-alone Enzyme |
| GC-Rich PCR Performance | High |
| Velocidad de reacción | 30 min |
| Técnica | Transcripción reversa |
| Temperatura óptima de reacción | De 50 °C a 55 °C |
| Cantidad | 2.000 unidades |
| Transcriptasa inversa | Maxima |
| Actividad de la ribonucleasa H | Sí |
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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
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