Invitrogen™ Biblioteca CRISPR de quinasa humana LentiArray™

La galardonada biblioteca CRISPR de quinasa humana Invitrogen™ LentiArray™ procesa 822 genes con hasta 4 ARNg por objetivo genético (agrupados en un solo pocillo) para un total de 3288 ARNg. Las bibliotecas se entregan como 100 μl de partículas lentivirales listas para su uso por objetivo genético con un título promedio de 1x10⁸ TU/ml (titulación funcional determinada por la resistencia a los antibióticos).

Las quinasas están involucradas en casi todas las cascadas de señalización, y la disregulación de la actividad de la quinasa está relacionada con el desarrollo de numerosas enfermedades, por lo que son una clase clave de fármacos objetivo. Los objetivos genéticos de esta biblioteca se han seleccionado utilizando las bases de datos genómicos más actualizadas, incluida la base de datos NCBI RefSeq, y se hizo una referencia cruzada a la base de datos del Consorcio de Ontología Genética (GO) o el Comité de Nomenclatura Genética HUGO (HGNC), así como recursos adicionales, como la base de datos KinBase.

Desarrolladas para obtener éxito
Las bibliotecas CRISPR LentiArray se han desarrollado con diseños de ARNg producidos mediante el algoritmo de diseño de ARNg CRISPR exclusivo de Thermo Fisher Scientific. Este algoritmo incorpora la última investigación de diseño de ARNg, así como nuestra amplia experiencia interna, para producir diseños de la más alta calidad. Los diseños de ARNg incluidos en las bibliotecas de CRISPR LentiArray se seleccionan para obtener la máxima eficacia de edición y especificidad, y están diseñados para eliminar todas las isoformas conocidas del gen diana. Para cada objetivo genético se incluyen hasta cuatro ARNg de alta calidad para ayudar a garantizar una eliminación muy eficaz del gen diana en una amplia variedad de tipos celulares.

Diseñe y ejecute sus experimentos sin limitaciones
Las bibliotecas LentiArray CRISPR están diseñadas y construidas para brindarle un control completo sobre su diseño experimental. Utilizan un diseño de dos vectores, que expresa la nucleasa Cas9 y el ARNg de construcciones lentivirales separadas, lo que le permite dictar cuándo y cómo se entregan las herramientas de edición del genoma a sus células.

La construcción del lentivirus con Cas9 LentiArray expresa una nucleasa Cas9 humana optimizada para codón con un gen de resistencia a la blasticidina bajo el control del promotor EF-1α (EFS). Puede elegir coinfectar sus células con los lentivirus de ARNg LentiArray y el lentivirus con Cas9 o solo con el lentivirus con Cas9 LentiArray para establecer una línea celular estable de expresión de Cas9. Con las bibliotecas LentiArray CRISPR tiene la libertad de diseñar el enfoque experimental que mejor se adapte a su sistema modelo y sus objetivos de detección.

Además, para minimizar las restricciones a su diseño experimental, los lentivirus de ARNg que componen las bibliotecas de CRISPR LentiArray no contienen marcadores fluorescentes. Esto permite que los indicadores de cualquier longitud de onda se utilicen con las bibliotecas y amplía su capacidad para realizar experimentos multiplex. Para líneas de células que supongan un reto, los lentivirus de ARNg LentiArray contienen un gen de resistencia a la puromicina que permite el enriquecimiento de la población de células editadas y conduce a fenotipos más fuertes.

Optimice el diseño de su ensayo y confíe plenamente en sus resultados con los controles LentiArray
Los controles de alta calidad son la piedra angular de una detección exitosa. La línea de productos de bibliotecas LentiArray CRISPR incluye un conjunto de controles para ayudarle a desarrollar rápidamente su ensayo y darle confianza en la definición de sus criterios de éxito.