Invitrogen™ LentiArray™ Human Cell Cycle CRISPR Library

La galardonada biblioteca de ciclo celular humano Invitrogen™ LentiArray™ procesa 1444 genes con hasta 4 ARNg por objetivo genético (agrupados en un solo pocillo) para un total de 5776 ARNg. Las bibliotecas se entregan como 100 μl de partículas lentivirales listas para su uso por objetivo genético, con una titulación media de 1x10⁸ TU/ml (titulación funcional determinada por la resistencia a los antibióticos).

Los reguladores del ciclo celular son importantes para el desarrollo normal y también desempeñan un papel importante en el desarrollo del cáncer, enfermedades cardiovasculares, inflamatorias y neurodegenerativas. Los objetivos genéticos de la biblioteca de ciclo celular humano LentiArray se seleccionaron utilizando las bases de datos genómicos más actualizadas, incluida la base de datos NCBI RefSeq, y se hizo referencia a la base de datos del Consorcio de Ontología génica (GO) o el Comité de Nomenclatura Genética HUGO (HGNC), e incluyen quinasas dependientes de ciclina, o CDK, reguladores de la progresión del ciclo celular como las proteínas de la familia CIP/KIP y miembros de la familia INK4 de inhibidores del ciclo celular, proteínas de la familia del retinoblastoma y factores de replicación del ADN como las proteínas del ciclo de división celular (CDC). Los diseños de ARNg para cada objetivo se crearon utilizando el algoritmo de diseño de ARNg patentado por Thermo Fisher Scientific.

Construidas para tener éxito
Las bibliotecas LentiArray CRISPR están construidas con diseños de ARNg producidos con el algoritmo de diseño de ARNg CRISPR, patentado por Thermo Fisher Scientific’. Este algoritmo incorpora la última investigación de diseño de ARNg, así como nuestra amplia experiencia interna, para producir diseños de la más alta calidad. Los diseños de ARNg incluidos en las bibliotecas de CRISPR LentiArray se seleccionan para obtener la máxima eficacia de edición y especificidad, y están diseñados para eliminar todas las isoformas conocidas del gen diana. Para cada gen diana se incluyen hasta cuatro ARNg de alta calidad para ayudar a garantizar una eliminación muy eficaz del gen diana en una amplia variedad de tipos celulares.

Diseñe y ejecute sus experimentos sin limitaciones
Las bibliotecas de CRISPR LentiArray están diseñadas y construidas para darle un control completo sobre su diseño experimental. Utilizan un diseño de dos vectores, que expresa la nucleasa Cas9 y el ARNg de construcciones lentivirales separadas, lo que le permite dictar cuándo y cómo se entregan las herramientas de edición del genoma a sus células.

La construcción de lentivirus con Cas9 LentiArray expresa una nucleasa Cas9 humana optimizada para codón con un gen de resistencia a la blasticidina bajo el control del promotor EF-1α (EFS). Puede elegir coinfectar sus células con los lentivirus de ARNg LentiArray y el lentivirus con Cas9 o solo con el lentivirus con Cas9 LentiArray para establecer una línea celular estable de expresión de Cas9. Con las bibliotecas de CRISPR LentiArray tiene la libertad de diseñar el enfoque experimental que mejor se adapte a su sistema modelo y sus objetivos de detección.

Además, para minimizar las restricciones a su diseño experimental, los lentivirus de ARNg que componen las bibliotecas de CRISPR LentiArray no contienen marcadores fluorescentes. Esto permite que los indicadores de cualquier longitud de onda se utilicen con las bibliotecas y amplía su capacidad para realizar experimentos multiplex. Para las líneas de células que supongan un reto, , los lentivirus de ARNg LentiArray contienen un gen de resistencia a la puromicina que permite el enriquecimiento de la población de células editadas y conduce a fenotipos más fuertes.

Optimice el diseño de su ensayo y confíe plenamente en sus resultados con los controles LentiArray
Los controles de alta calidad son la piedra angular de una detección exitosa. La línea de productos de bibliotecas CRISPR LentiArray incluye un conjunto de controles para ayudarle a desarrollar rápidamente su ensayo y aportar fiabilidad