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Thermo Scientific™ Kit de ensayo de coactivadores de ER alfa TR-FRET LanthaScreen™

Código de producto. 15617858
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Cantidad:
800 ensayos de 20 μL
Tamaño de la unidad:
paquete de 800
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15617858 800 ensayos de 20 μL paquete de 800
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Código de producto. 15617858 Proveedor Thermo Scientific™ N.º de proveedor A15885

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Descripción

El kit de ensayo del coactivador LanthaScreen™ TR-FRET ER alfa proporciona un método sensible y robusto para el cribado analítico masivo de los potenciales ligandos alfa de receptor de estrógenos (ER) como agonistas o antagonistas del reclutamiento de coactivador dependiente de ligando.

El kit de ensayo de coactivadores TR-FRET ER alpha LanthaScreen™ utiliza un dominio de unión al ligando ER alfa (ER alfa-LBD) etiquetado con glutatión-S-transferasa (GST), un anticuerpo anti-GST etiquetado con terbio (Tb) y un péptido coactivador etiquetado con fluoresceína en un formato de ensayo de mezcla y lectura homogéneo.

Modo agonista

Para realizar el ensayo de coactivadores TR-FRET ER alpha LanthaScreen en modo agonista (para identificar compuestos agonistas), se añade ER alfa-LBD a los compuestos problema ligandos seguido de la adición de una mezcla de fluoresceína-péptido coactivador y anticuerpo anti-GST etiquetado con Tb. Después de la incubación a temperatura ambiente, se calcula la relación de emisión TR-FRET 520:495 nm y se utiliza para determinar la EC50 a partir de una curva de respuesta de dosis del compuesto. Basado en la biología de la interacción de ER alfa-péptido coactivador, esta EC50 del ligando es un valor compuesto que representa la cantidad de ligando necesaria para unirse al receptor, efectuar un cambio conformacional e incorporar el péptido coactivador.

Modo antagonista

Para realizar el ensayo de coactivadores TR-FRET ER alpha LanthaScreen en modo antagonista (para identificar compuestos antagonistas), se añade ER alfa-LBD a los compuestos problema ligandos seguido de la adición de una mezcla de fluoresceína-péptido coactivador agonista y anticuerpo anti-GST etiquetado con terbio (Tb). La concentración de agonista utilizada en este modo es la concentración de EC80 determinada por la primera ejecución del ensayo en modo agonista.

TRUSTED_SUSTAINABILITY

Especificaciones

Contenido y almacenamiento 1 tubo de proteína recombinante de dominio de unión del ligando ER alfa (almacenar de -68 a -85 °C)
1 tubo de péptido (almacenar de -5 a -30 °C)
2 frascos de tampón TR-FRET (almacenar de -5 a -30 °C)
1 tubo de Tb-Anti-GST Ab (almacenar de -5 a -30 °C)
1 tubo de DTT (almacenar de -5 a -30 °C)
Para utilizar con (aplicación) Ensayo de interacción de cofactores, ensayo de receptores nucleares
Línea de productos LanthaScreen
Cantidad 800 ensayos de 20 μL
Tipo Kit de ensayo de coactivadores TR-FRET ER alpha

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

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