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Descripción
Klenow Fragment, exo-, es el fragmento grande de la ADN polimerasa I. Presenta actividad de la polimerasa 5'→3' , pero carece de actividades de exonucleasa 3'→5' y 5'→3' de la ADN polimerasa I. La actividad exonucleasa 3'→5' de la enzima se elimina por mutaciones en el sitio activo de la exonucleasa 3'→5'.
Características destacadas
- Carece de actividad exonucleasa 3'→5'
- Incorpora nucleótidos modificados (por ejemplo, Cy3, Cy5, nucleótidos marcados con flurosceína, rodamina, aminoalilo y biotina)
- Activa en tampones de enzimas de restricción, PCR y RT
Aplicaciones
- Etiquetado de ADN mediante cebado aleatorio
- Etiquetado por relleno de extremos 5' de dsADN
- Amplificación por desplazamiento de la cadena (SDA)
- Secuenciación de ADN por el método Sanger
Nota
Klenow Fragment, exo-, no se recomienda para reacciones de blunting para producir extremos romos de ADN antes de la ligación de ADN, puesto que, con frecuencia, añade uno o varios nucleótidos adicionales al extremo 3' de los sustratos de ADN de extremos romos independientemente de la plantilla.
Especificaciones
Especificaciones
| Concentración | 5 U/μl |
| Polimerasa | DNA Polymerase I |
| Tampón compatible | Enzima de restricción, PCR, tampón RT |
| Cantidad | 300 U |
| Tipo de producto | Fragmento Klenow |
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
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