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Invitrogen™ Kit de clonación de PCR Zero Blunt™ TOPO™ con células de E. coli químicamente competentes One Shot™ TOP10

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Description

Includes

Linearized and topoisomerase I-activated pCR™Blunt II-TOPO™ vector; Salt solution; dNTPs; Control template; M13 forward and reverse primers; Sterile water; One Shot™ Chemically Competent or Electrocomp™ E. coli; S.O.C. medium; Supercoiled pUC19 control plasmid

Proporciona una estrategia de clonación altamente eficaz, en un solo paso y en 5 min (TOPO Cloning) para la inserción directa de productos de PCR de extremos romos amplificados con polimerasas termoestables de corrección en un vector plasmídico

  • Incluye el vector Zero Blunt™ TOPO™ que contiene el gen ccdB para la selección positiva, de forma que solo permite el crecimiento de vectores plasmídicos con recombinantes.
  • Disponible con una variedad de células competentes o sin células competentes
  • Rápido y fácil: vaya de las PCR a los clones en solo 3 pasos, incluida una reacción de clonación de 5 minutos
  • Eficaz: obtenga hasta un 95% de clones con el inserto correcto
  • Probado: rendimiento fiable durante más de una década con más de 20.000 citas.
  • Sencillo: no se requieren ligasas, procedimientos posteriores a la PCR ni primers de PCR con secuencias específicas
  • Preciso: se utiliza con ADN polimerasas de alta fidelidad, sin necesidad de un saliente A en el producto de PCR
  • El vector PCR™ Blunt II-TOPO™ está diseñado para la clonación de productos de PCR de extremo romo generados por polimerasas de corrección termoestables como la ADN polimerasa Platinum™ pfx.
  • Permite la selección directa de recombinantes mediante la alteración del gen letal de E.coli ccdB. El vector contiene el gen ccdB fusionado al extremo C del fragmento LacZα. La ligadura de un producto de PCR con extremo romo altera la expresión de la fusión del gel LacZα-ccdB, lo que solo permite el crecimiento de recombinantes positivos durante la transformación. Las células que contienen un vector no recombinante mueren durante la siembra en placa. Por lo tanto, no se precisa blue/white screening.
  • Mediante la tecnología de clonación TOPO™, no hay necesidad de emplear primers de PCR que contengan secuencias específicas, procedimientos posteriores a la PCR, preparación de vectores u otros pasos de manipulación de ADN que consumen mucho tiempo. Solo tiene que añadir su reacción de PCR directamente al vector cargado con la topoisomerasa suministrado, incubar 5 minutos y transformar células competentes de E. coli.
  • Los kits de clonación de PCR Zero Blunt™ TOPO™ para la inserción directa de productos de PCR de extremo romo en un vector plasmídico se pueden adquirir con una variedad de células competentes que ofrecen diferentes ventajas

Order Info

Condición de envío: Hielo seco

TRUSTED_SUSTAINABILITY

Specifications

Cepa bacteriana o de levadura TOP10
Tipo de célula Químicamente competente
Método de clonación Blunt TOPO™
Contenido y almacenamiento Caja 1:
• Vector pCR™Blunt II-TOPO™ linealizado y activado con la topoisomerasa I
• Solución salina
• dNTP
• Plantilla de control
• Primers directos e inversos M13
• Agua estéril

Almacenar entre -5 y -30 °C.
Todos los reactivos son estables durante 6 meses si se almacenan adecuadamente.

Caja 2:
• E. coli químicamente competente One Shot™ o Electrocomp™
• Medio S.O.C.
• Plásmido de control superhelicoidal pUC19

Almacenar a entre -68 y -85 °C.
Formato Kit
Línea de productos One Shot
Tipo de producto Kit de clonación de PCR
Promotor SP6
Cantidad 25 reacciones
Vector Vectores de clonación de ADN romos

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

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