Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit for Subcloning, with TOP10F' E. coli

Los kits de clonación están disponibles con una serie de células competentes, o sin ellas, dependiendo de sus necesidades y presupuesto. Cada kit utiliza el vector pCR™ 2.1-TOPO TA con prácticos sitios de restricción para subclonación.
Vector pCR 2.1-TOPO TA: simplicidad en clonación y subclonación
El vector pCR 2.1-TOPO TA se linealiza con salientes 3'-timidina (T) para ligar directamente productos de PCR amplificados con Taq polimerasa (TA Cloning) y se «activa» con topoisomerasa I unida covalentemente. No es necesario añadir ligasa y la clonación se completa en 5 minutos. Los sitios EcoRI que flanquean el sitio de inserción del producto de PCR permiten una fácil escisión de los insertos o su uso con cualquier combinación de 15 prácticos sitios de restricción que flanquean su inserto de PCR para una subclonación fácil y direccional.
Selección y manipulación de clones pCR 2.1-TOPO TA
El vector pCR2.1-TOPO TA contiene marcadores de resistencia a ampicilina y kanamicina y el gen LacZα para el cribaje azul/blanco.
Clonación simplificada basada en TOPO
Con la tecnología de clonación TOPO, no es necesario utilizar primers de PCR que contengan secuencias específicas, procedimientos posteriores a la PCR, preparación de vectores u otros pasos de manipulación de ADN que requieran mucho tiempo. Solo tiene que añadir su reacción de PCR directamente al vector cargado con la topoisomerasa suministrado, incubar 5 minutos y transformar células competentes de E. coli.
Clonación eficiente
Con hasta un 95 % de los clones con el inserto deseado, podrá sondear menor cantidad de clones y ahorrar tiempo y dinero. El vector pCR2.1-TOPO TA utilizado en este kit se suministra con salientes 3'-T para una ligadura eficaz de productos de PCR amplificados con la polimerasa Taq, que contienen salientes 3'-A.
La referencia en clonación
En el campo de la clonación, la tecnología de clonación TOPO ha sido un socio fiable durante más de diez años para miles de científicos. Rápida, fácil de usar y eficiente, la clonación TOPO se ha aplicado a muchos vectores distintos para multitud de aplicaciones.
Kits TOPO TA Cloning para subclonación: opciones de kits
El kit TOPO TA Cloning para secuenciación puede adquirirse con diversas células competentes que ofrecen distintas ventajas dependiendo de sus necesidades:

• Clonación general: Células TOP10 (n.º de cat. K4500-01, K4500-40)
• Clonación de gran eficacia: Células TOP10 Electrocomp™ (n.º de cat. K4560-01, K4560-40)
• Clonación general, resistencia T1 bacteriófaga: Células DH5α-T1R (n.º de cat. K4520-01, K4520-40)
• Crecimiento rápido: E. Coli Mach1™ -T1R químicamente competente (n.º de Nº K4510-20)
• Utilice sus propias células: flexibilidad y ahorro (n.º de de cat. 450641)

• Rápido y fácil: de PCR a clones en solo tres pasos y en tan solo 5 minutos de manipulación
• Eficiente: obtenga hasta el 95 % de clones con el inserto adecuado
• Probado: rendimiento fiable durante más de una década con más de 4000 citas
• Sencillo: no se requieren ligasas, procedimientos posteriores a la PCR ni primers de PCR con secuencias específicas

• Vector: Vector pCR 2.1-TOPO TA: vector de subclonación con 15 prácticos sitios de restricción que flanquean al inserto para una subclonación direccional sencilla
• Método de clonación: Clonación TA TOPO: Ligadura en 5 minutos basada en topoisomerasa I de productos de PCR con salientes 3′-A (amplificados con polimerasa Taq) al vector TOPO con salientes T
• Células competentes: Varias opciones: seleccione entre kits con células generales, de alta eficacia, con resistencia T1 bacteriófaga y competentes de rápido crecimiento o utilice las suyas propias

Clonación, clonación por PCR