Invitrogen™ Kit TOPO™ TA Cloning™ para subclonación, con células E. coli químicamente competentes One Shot™ TOP10
25 reacciones
Proporciona una estrategia de clonación de gran eficacia, de 5 minutos y de un solo paso (TOPO Cloning) para la inserción directa de productos PCR amplificados con polimerasa Taq en un vector plasmídico para subclonación.
Marca:Invitrogen™
K450001
638.40 EUR hasta el 2025-06-30 Use el código promocional "24108" para aplicar la oferta.
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Includes: Topoisomerase I-activated pCR™2.1-TOPO™ vector; PCR buffer; Salt solution; dNTPs; Control template; M13 forward and reverse primers; Control PCR primers; Sterile water One Shot™ Chemically Competent or Electrocomp™ E. coli; S.O.C. medium; Supercoiled pUC19 control plasmid
Los kits de clonación están disponibles con una serie de células competentes, o sin ellas, dependiendo de sus necesidades y presupuesto. Cada kit utiliza el vector pCR™ 2.1-TOPO TA con prácticos sitios de restricción para subclonación.
Vector pCR 2.1-TOPO TA: simplicidad en clonación y subclonación El vector pCR 2.1-TOPO TA se lineariza con extremos 3'-timidina (T) para ligar directamente productos de PCR amplificados con Taq polimerasa (TA cloning™) y es «activado» con topoisomerasa I unida covalentemente. No es necesario añadir ligasa y la clonación se completa en 5 minutos. Los sitios EcoRI que flanquean el sitio de inserción del producto de PCR permiten una sencilla escisión de insertos o usar cualquier combinación de 15 prácticos sitios de restricción que flanquean el inserto de PCR para una sencilla subclonación direccional.
Manipulación y selección de clones de pCR 2.1-TOPO TA El vector pCR 2.1-TOPO TA contiene marcadores de resistencia de ampicilina y kanamicina y el gen LacZα para cribaje azul/blanco.
Clonación simplificada basada en TOPO Mediante la tecnología de clonación TOPO, no hay necesidad de emplear primers de PCR que contengan secuencias específicas, procedimientos posteriores a la PCR, preparación de vectores u otros pasos de manipulación de ADN que consumen mucho tiempo. Solo tiene que añadir su reacción de PCR directamente al vector cargado con la topoisomerasa suministrado, incubar 5 minutos y transformar con las células competentes de E. coli.
Clonación eficiente Con hasta un 95 % de los clones transportado al inserto deseado, podrá filtrar menos clones, lo que le ayudará a ahorrar tiempo y dinero. El vector pCR 2.1-TOPO TA utilizado en este kit se suministra con salientes 3'-T para una ligación eficaz de los productos PCR amplificados con polimerasa Taq, que contienen salientes 3'A.
El estándar en clonación En el campo de la clonación, la tecnología de clonación TOPO™ ha sido un socio fiable durante más de diez años para miles de científicos. Rápida, fácil de usar y eficiente, la clonación TOPO se ha aplicado a muchos vectores distintos para multitud de aplicaciones.
Kits TOPO TA Cloning para subclonación: opciones de kits El kit TOPO TA Cloning para secuenciación puede adquirirse con diversas células competentes que ofrecen distintas ventajas dependiendo de sus necesidades:
Clonación general: Células TOP10 (n.º de cat. K4500-01, K4500-40)
Clonación de gran eficacia: Células TOP10 Electrocomp™ (n.º de cat. K4560-01, K4560-40)
Clonación general, resistencia T1 bacteriófaga: Células DH5α-T1R (n.º de cat. K4520-01, K4520-40)
Crecimiento rápido: E. Coli Mach1™ -T1R químicamente competente (n.º de Nº K4510-20)
Utilice sus propias células: flexibilidad y ahorro (n.º de de cat. 450641)
También ofrecemos dos versiones del kit que incluyen un kit de minipreparación rápida de plásmidos PureLink™ (n.º de cat. K4500-02 y K4510-02) para utilizar en el aislamiento de un plásmido recombinante limpio y listo para secuenciación.
Rápido y fácil: de PCR a clones en solo tres pasos y en tan solo 5 minutos de manipulación
Eficiente: obtenga hasta el 95 % de clones con el inserto adecuado
Probado: rendimiento fiable durante más de una década con más de 4000 citas
Sencillo: no se requieren ligasas, procedimientos posteriores a la PCR ni primers de PCR con secuencias específicas
Vector pCR 2.1-TOPO TA: vector de subclonación con 15 prácticos sitios de restricción que flanquean al inserto para una subclonación direccional sencilla
Método de clonación: Clonación TA TOPO: Ligación en 5 minutos con base de Topoisomerasa I de productos PCR con salientes 3 ft.-A (amplificados con polimerasa Taq) al vector TOPO con salientes T
Células competentes: varias opciones: seleccione entre kits con células generales, de alta eficacia, con resistencia T1 bacteriófaga y competentes de rápido crecimiento o utilice las suyas propias
Caja 1: • Vector pCR™2.1-TOPO™ activado con la topoisomerasa I • Tampón de PCR • Solución salina • dNTP • Plantilla de control • Primers directos e inversos M13 • Primers de PCR de control • Agua estéril
Almacenar entre -5 y -30 °C. Todos los reactivos son estables durante 6 meses si se almacenan adecuadamente.
Caja 2: • E. coli químicamente competente One Shot™ o Electrocomp™ • Medio S.O.C. • Plásmido de control superhelicoidal pUC19
