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Invitrogen™ Sistema de síntesis de primera cadena SuperScript™ III
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Descripción
Includes
Oligo(dT)20 (50 μm), 50 μl; hexámeros aleatorios (50 ng/μl), 250 μl; tampón RT 10X, 1 ml; 0,1 m de DTT, 250 μl; cloruro magnésico de 25 mm, 500 μl; 10 mm de mezcla de dNTP, 250 μl; RT SuperScript III (200 U/μl), 50 μl; RNaseOUT (40 U/μl), 100 μl; ARNasa H de E. coli (2 U/μl), 50 μl; agua tratada con DEPC, 1,2 ml; ARN de HeLa total (10 ng/μl), 20 μl; cebador de control sentido (10 μm), 25 μl; cebador de control antisentido (10 μm), 25 μl
The SuperScript III First-Strand Synthesis System for RT-PCR is optimized to synthesize first-strand cDNA from purified poly(A)+ or total RNA. RNA targets from 100 bp to >12 kb can be detected with this system and the amount of starting material can vary from 1 pg to 5 μg of total RNA. SuperScript III Reverse Transcriptase is a version of M-MLV RT that has been engineered to reduce RNase H activity and provide increased thermal stability. The enzyme is used to synthesize cDNA at a temperature range of 42–55°C, providing increased specificity, higher yields of cDNA, and more full-length product than other reverse transcriptases. Because SuperScript III RT is not significantly inhibited by ribosomal and transfer RNA, it may be used to synthesize first-strand cDNA from a total RNA preparation.
Uso del sistema de primera cadena SuperScript™ III
La síntesis de ADNc se realiza en el primer paso mediante ARN total o ARN seleccionado poli(A)+ cebado con oligo(dT), cebadores aleatorios o un cebador específico de genes. En el segundo paso, la PCR se realiza en un tubo independiente con cebadores específicos para el gen de interés. Para la PCR, recomendamos una de las siguientes ADN polimerasas: La ADN polimerasa Platinum™ Taq proporciona condiciones de inicio en caliente automático para una mayor especificidad de hasta 4 kb, la ADN polimerasa de alta fidelidad Platinum™ Taq proporciona un resultado superior y alta fidelidad para objetivos de hasta 15 kb y la ADN polimerasa Platinum™ Pfx proporciona una fidelidad máxima para objetivos de hasta 12 kb.
Información de órdenes
Condición de envío: Hielo seco
Especificaciones
Especificaciones
| Contenido y almacenamiento | El sistema de síntesis de primera cadena SuperScript™ III para RT-PCR se suministra con lo siguiente: • Oligo(dT)20 (50 μm), 50 μl • Hexámeros aleatorios (50 ng/μl), 250 μl • de tampón RT 10X, 1 ml • 0,1 m de DTT, 250 μl • 25 mm de cloruro magnésico, 500 μl • 10 mm de mezcla de dNTP, 250 μl • RT SuperScript III (200 U/μl), 50 μl • RNaseOUT (40 U/μl), 100 μl • ARNasa H de E. coli (2 U/μl), 50 μl • Agua tratada con DEPC, 1,2 ml • ARN HeLa total (10 ng/μl), 20 μl • Cebador de control sentido (10 μm), 25 μl • Cebador de control antisentido (10 μm), 25 μl Suficiente para 50 reacciones según un tamaño de reacción de 20 μl. Almacenar a – 20 °C. |
| Formato | Kit |
| GC-Rich PCR Performance | Alto |
| Velocidad de reacción | 50 min |
| Técnica | Transcripción reversa |
| Temperatura óptima de reacción | 50 °C |
| Cantidad | 50 rxns |
| Transcriptasa inversa | SuperScript III |
| Condiciones de envío | Hielo seco |
| Para utilizar con (aplicación) | Real Time PCR (qPCR), RT-PCR |
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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
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