Invitrogen™ Sistema de RT-PCR SuperScript™ III de un paso con ADN polimerasa de alta fidelidad Platinum™ Taq

Amplificación de PCR de alta fidelidad
La ADN polimerasa de alta fidelidad Taq es ideal para amplificar fragmentos de ADN cuando es necesario contar con una producción elevada y una amplificación sólida. La fidelidad se maximiza mediante el uso de una mezcla de ADN polimerasa Platinum Taq y la enzima de corrección (actividad exonucleasa 3’-5’) de la especie Pyrococcus polimerasa GB-D. La especificidad de la PCR se ha mejorado con la incorporación de tecnología de “arranque en caliente” automático de Platinum.

• El sistema SuperScript III One-Step RT-PCR con ADN polimerasa Platinum Taq combina la elevada estabilidad térmica del SuperScript III RT con la especificidad del ADN polimerasa de alta fidelidad Platinum Taq para aumentar la especificidad del priming, generar mayores producciones de producto e identificar un rango más amplio de objetivos.
• El formato de un solo paso permite un fácil análisis de expresión de los genes o de detección de ARN viral o raro.
• Sensibilidad: detección rutinaria de hasta solo 1pg de ARN total
• Comodidad: Formato de tubo único que ofrece rapidez, comodidad y una menor variabilidad entre reacciones. Compatible con multiplexing.
• Especificidad: utiliza RT SuperScript III para la síntesis de ADNc hasta 55°C, para un priming más específico con primers específicos de genes.
• Tamaño del amplicón: Detección de objetivos de 300 bp a 10kb para mayor flexibilidad

Uso del sistema SuperScript One-Step El sistema utiliza una mezcla de transcriptasa inversa SuperScript III y polimerasa de ADN de alta fidelidad Platinum Taq para mejorar los rendimientos de RT-PCR y la fidelidad, así como la detección de plantillas de mayor tamaño. El sistema puede detectar una amplia gama de objetivos de ARN desde 300 pb a 10 kb, y es compatible con aplicaciones multiplexadas. La cantidad de material de partida puede oscilar entre 1pg y 1 μg de ARN total. El sistema consta de dos componentes principales: Mezcla de enzimas de alta fidelidad SuperScript III RT/ Platinum Taq y mezcla de reacción 2X. La transcriptasa inversa SuperScript III es una versión de la transcriptasa inversa (RT) del virus de la leucemia murina Moloney (M-MLV) que se ha diseñado para reducir la actividad de la ARNasa H y proporcionar mayor estabilidad térmica. La enzima puede sintetizar ADNc en un intervalo de temperatura de 45 a 60 °C, y proporcionar una mayor especificidad, mayor producción de ADNc y más cantidad de producto de cadena completa que otras transcriptasas inversas. Puesto que la transcriptasa inversa SuperScript III no se ve significativamente inhibida por el ARN de transferencia y ribosómico, se puede emplear para sintetizar ADNc a partir de ARN total. Tamaño del producto final: 10 kb o menos.

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