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Invitrogen™ pENTR™/SD/D-TOPO™ Cloning Kit, with One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli
Descripción
Includes
Vector pENTR/SD/D-TOPO, dNTP, solución salina, agua estéril, primers de secuenciación M13 universales, E. coli TOP10 químicamente OneShot, medio SOC. y un plásmido de control de pUC19.
- Los productos de PCR de extremo romo se clonan de forma direccional en el vector de entrada pENTR/SD/D-TOPO con una eficacia superior al 90 % e incluyen una secuencia de Shine-Dalgarno de flujo ascendente para la expresión en procariotas
- Transporte rápido de los genes clonados entre múltiples sistemas de vectores
- Rendimiento fiable
- Vector de clonación direccional para la entrada al sistema Gateway y optimizado para expresión procariota
- Para acceder al sistema Gateway, amplifique mediante PCR el gen de interés y añada el producto directamente a la topoisomerasa suministrada y cargada en el vector pENTR/SD/D-TOPO, realice una incubación de 5 minutos y transforme las células competentes de E. coli suministradas
- Los clones de entrada de Gateway resultantes que contienen attL están listos para someterse a una recombinación eficaz con los vectores de destino Gateway seleccionados
- El vector pENTR/SD/D-TOPO incluye un potenciador traslacional del gen 10 de T7 y un sitio de unión a ribosomas (RBS) para una expresión óptima de la proteína nativa después de la recombinación con vectores de destino Gateway procarióticos
- También puede utilizar un vector para la expresión en otros sistemas huéspedes mediante la recombinación con diferentes vectores de destino
- El vector tiene sitios de secuenciación de primers M13 y T7 y sitios de recombinación de attL que flanquean el sitio de inserción del producto de la PCR, lo que permite verificar fácilmente la secuencia de los clones y realizar la recombinación deseada de los vectores de destino Gateway que contienen attR
- Se emplea un gen de resistencia a kanamicina y un origen de pUC para la selección y la propagación de número de copias alto en E. coli
- Protuberancia con cuatro bases en los pares del vector con una secuencia de cuatro bases diseñada en el cebador directo que se emplea en la reacción de PCR para ofrecer direccionalidad a la reacción de ligación de la topoisomerasa
Clonación, clonación Gateway
Especificaciones
Especificaciones
| Método de clonación | TOPO™ direccional |
| Contenido y almacenamiento | El kit de clonación pENTR™⁄SD⁄D-TOPO™ contiene un vector pENTR⁄SD⁄D-TOPO™, dNTP, solución salina, agua estéril, primers de secuenciación M13 universales, E. coli TOP10 químicamente OneShot™, medio SOC. y un plásmido de control de pUC19. Almacene la E. coli competente a -80 °C. Almacene todos los demás componentes a - 20 °C. |
| N.º de reacciones | 20 reactions |
| Línea de productos | One Shot |
| Tipo de producto | Kit de clonación TOPO |
| Cantidad | 20 reacciones |
| Vector | pENTR |
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Título del producto
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