Invitrogen™ Kit de clonación pENTR™/D-TOPO™, con E. coli TOP10 químicamente competente One Shot™

Descripción

• Los productos de PCR con extremo romo se clonan de forma direccional con una eficacia superior al 90 % y sin necesidad de ligasa, procedimientos posteriores a la PCR o enzimas de restricción
• Transporte rápido de los genes clonados entre múltiples sistemas de vectores
• Rendimiento fiable
• Vector de clonación direccional para la entrada al sistema Gateway
• Para acceder al sistema Gateway, amplifique mediante PCR el gen de interés y añada el producto directamente a la topoisomerasa suministrada y cargada en el vector pENTR/D-TOPO, realice una incubación de 5 minutos y transforme las células competentes de E. coli suministradas
• Los clones de entrada de Gateway resultantes que contienen attL están listos para someterse a una recombinación eficaz con los vectores de destino Gateway seleccionados
• El vector pENTR/D-TOPO incluye sitios de secuenciación de primers M13 y T7 y sitios de recombinación de attL que flanquean el sitio de inserción del producto de la PCR, lo que permite verificar fácilmente la secuencia de los clones y realizar la recombinación deseada de los vectores de destino Gateway que contienen attR
• Se emplea un gen de resistencia a kanamicina y un origen de pUC para la selección y la propagación de número de copias alto en E. coli
• Protuberancia con cuatro bases en los pares del vector con una secuencia de cuatro bases diseñada en el cebador directo que se emplea en la reacción de PCR para ofrecer direccionalidad a la reacción de ligación de la topoisomerasa
• Sortea las limitaciones de la clonación con restricciones, lo que le permite tener acceso a prácticamente cualquier sistema de expresión en tan solo una hora, con una reacción de recombinación Gateway reversible y eficaz al 99 %
• Mueve la misma secuencia de ADN entre distintos vectores sin el uso de enzimas de restricción, ligasa, pasos de subclonación, detección de innumerables colonias ni resecuenciación para ahorrar tiempo, dinero y esfuerzo.

Clonación, clonación Gateway