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Invitrogen™ Champion™ pET200 Directional TOPO™ Expression Kit with BL21 Star™ (DE3) One Shot™ Chemically Competent E. coli

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Código de producto. 10634223 Proveedor Invitrogen™ N.º de proveedor K20001

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Includes

200 ng de vector Champion pET linealizado activado por topoisomerasa I; agua estéril; dNTPs; 10 tampones de PCR; solución salina; muestra y cebadores de control; cebadores para secuenciación o detección de PCR; y un control de expresión. La caja TOP10 contiene alícuotas de 21 x 50 μl de E. coli químicamente competente, medio SOC y un plásmido de control. La caja BL21 Star(DE3) contiene 21 alícuotas de 50μ l de E. coli químicamente competente, medio SOC y un plásmido de control.

La proteína de interés puede alcanzar niveles superiores al 50 por ciento de proteína celular total en E. coli durante la expresión

  • Basada en vectores de expresión T7 originalmente desarrollados por Studier y sus compañeros, la expresión de alto nivel se logra porque la ARN polimerasa T7 es más procesiva que la ARN polimerasa de E. coli nativa y se dedica a la transcripción de genes de interés
  • La producción de proteínas se mejora aún más en el sistema mediante la cepa de expresión BL21 StarE. coli, que mejora significativamente la estabilidad de las transcripciones de ARNm y aumenta la expresión de proteínas hasta diez veces
  • La clonación TOPO direccional simplificada y eficaz permite introducir rápidamente un vector de expresión ChampionpET
  • Estos kits incluyen vectores de expresión de ChampionpET linealizados y activados con la topoisomerasa I para la clonación direccional de cinco minutos a fin de facilitar la expresión génica con la enzima de corrección utilizada para PCR, lo que resulta en menos errores en los genes clonados.
  • Más del 90 % de los clones están en la orientación correcta para la expresión génica, lo que reduce el tiempo dedicado a la detección de colonias.

Expresión bacteriana/expresión de proteínas/proteínas, expresión, aislamiento y análisis

TRUSTED_SUSTAINABILITY

Especificaciones

Sistema constitutivo o inducible Inducible
Agente inductor IPTG
Promotor T7, lacO
Tipo de producto Kit de expresión TOPO
Agente de selección (eucariótico) Ninguno
Contenido y almacenamiento Cada kit de expresión TOPO™ direccional Champion™ pET se suministra como sistema de expresión completo. La caja de expresión TOPO™ direccional contiene 200 ng de vector Champion™ pET linealizado activado por topoisomerasa I; agua estéril; dNTPs; 10 tampones de PCR; solución salina; muestra y primers de control; primers para secuenciación o detección de PCR; y un control de expresión. Almacenar a – 20 °C. La caja One Shot™ TOP10 contiene 21 alícuotas de 50 µl de E. coli químicamente competente, medio SOC y un plásmido de control. Almacenar a - 80 °C. La caja One Shot™ BL21 Star™ (DE3) contiene 21 alícuotas de 50 µl de E. coli químicamente competente, medio SOC y un plásmido de control. Almacenar a - 80 °C. Los kits con tecnología Lumio™ incluyen 20 µl del reactivo de detección Lumio™. Almacenar a – 20 °C. Se garantiza la estabilidad durante 6 meses si se almacena correctamente.
Resistencia bacteriana a los antibióticos Kanamicina (KanR)
Cepa bacteriana o de levadura BL21 Star™(DE3)
Hendidura Sitio de reconocimiento de EK (enterocinasa)
Sistema de expresión E. coli
Mecanismo de expresión Expresión basada en células
Etiqueta de proteína Etiqueta His (6x), Etiqueta de epítopo Xpress
Método de clonación TOPO direccional
Cantidad 20 reacciones
Vector pET
Línea de productos One Shot
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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

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