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Invitrogen™ BLOCK-iT™ U6 RNAi Entry Vector Kit
Descripción
Includes
El kit de vectores de entrada BLOCK-iT™ U6 contiene dos cajas. La caja de clonación contiene cuatro tubos de vector linealizado a 5 ng/tubo, suficiente para completar 5 reacciones de clonación por tubo. También se incluyen 250 μl de tampón de recocido 10X, 20 μl de ligasa de ADN T4, 80 μl de tampón de ligasa de ADN 5X, 1,4 ng de oligo de control lacZ, 10 μl de plásmido de control lacZ liofilizado, 1,5 ml de agua libre de ADNasa/ARNasa, y 2 μg cada uno de primer de secuenciación directo e inverso.
Un proceso de clonación fácil coloca un ADN oligonucleótido de aproximadamente 50 bp inmediatamente después de un promotor tipo U6 pol III. La expresión de este cassette de ARNi forma una molécula de ARNhc en la célula que se procesará y actuará como ARN de interferencia pequeña (ARNip) que generará el efecto de ARNi.
Entrega del cassette de ARNi U6
Una vez que la clonación se ha completado, el vector de entrada U6 está listo para usarse inmediatamente en transfecciones transitorias utilizando un reactivo como Lipofectamine™ 2000. Esto hace que este sistema sea ideal para la detección inicial de ARNhc en muchos tipos de células de mamíferos. Como alternativa en los tipos de células difíciles de transfectar o sin división, o para entregar a sistemas de modelos animales, el cassette de ARNi puede recombinarse fácilmente en un vector de ARNi viral BLOCK-iT. Para la entrega y expresión lentiviral de ARNhc estables, vuelva a combinar el vector de entrada BLOCK-iT U6 con el vector de ARNi pLenti6/BLOCK-iT. Para la administración transitoria a tipos de células complicados usando transducción adenoviral, vuelva a combinar con el vector de ARNi pAd/BLOCK-iT. Representa una técnica preferida para analizar la regulación a la baja de genes.
Clonación, clonación Gateway, ARNi, ARNi, investigación de epigenética y ARN no codificante, ARNi basado en vectores
Especificaciones
Especificaciones
| Tipo de producto | Kit de vectores de entrada de ARNi |
| Contenido y almacenamiento | El kit de vectores de entrada BLOCK-iT™ U6 contiene dos cajas. La caja de clonación contiene cuatro tubos de vector linealizado a 5 ng/tubo, suficiente para completar 5 reacciones de clonación por tubo. También se incluyen 250 µl de tampón de recocido 10X, 20 µl de ligasa de ADN T4, 80 µl de tampón de ligasa de ADN 5X, 1,4 ng de oligo de control lacZ, 10 µl de plásmido de control lacZ liofilizado, 1,5 ml de agua libre de ADNasa/ARNasa, y 2 µg cada uno de primer de secuenciación directo e inverso. Almacene los vectores, tampones, oligos de control y plásmidos, agua y primers de secuenciación a -20 °C. La caja One Shot™ contiene reactivos de transformación que incluyen 21 alícuotas de 50 µl de E. coli químicamente competente TOP10 One Shot™, medio S.O.C. y un plasmídico de control superenrollado pUC19. Almacenar a - 80 °C. Se garantiza la estabilidad de todos los reactivos durante 6 meses si se almacenan correctamente. |
| Método de clonación | Gateway™ |
| Sistema constitutivo o inducible | Constitutivo |
| Tipo de entrega | Transfección |
| Tipo de RNAi | ARNhc |
| Vector | Vectores de ARNi BLOCK-iT |
| Promotor | U6 |
| Formato | Kit |
| Línea de productos | BLOCK-iT |
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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
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