Invitrogen™ BLOCK-iT™ Lentiviral RNAi Gateway™ Vector Kit

Un nuevo proceso de clonación coloca un oligonucleótido de ADN de aproximadamente 50 bp inmediatamente después de un promotor U6 pol III en el vector de entrada U6 BLOCK-iT. El oligonucleótido está diseñado para expresar el ARN que forma una estructura en tallo-bucle que contiene las regiones de sentido y antisentido de su gen diana de interés. Este ARNhc se vuelve a combinar en el vector pLenti6/BLOCK-iT-DEST. Después de la producción viral y la transducción, el ARNhc impulsado por el promotor U6 se integra de manera estable como un casete de ARNi. El ARNhc generado evita el mecanismo de defensa de los huéspedes y será eficaz en la producción de la respuesta de reducción genética de ARNi. Mediante el sistema de expresión de ARNi lentiviral BLOCK-iT, se puede realizar un análisis a largo plazo del bloqueo genético tanto en los tipos de células de mamíferos que se dividen como no, así como en los modelos animales.

El kit de vectores de entrada U6 ARNi BLOCK-iT permite la clonación optimizada de secuencias diana de ARNhc para pruebas en experimentos transitorios. Los casetes de expresión ARNi seleccionados se recombinan de forma rápida y eficaz desde el vector de entrada U6 ARNi BLOCK-iT en el vector pLenti6/BLOCK-iT-DEST a través de una reacción de recombinación Gateway LR estándar.

• Sitios attR para una recombinación eficiente con el vector de entrada Gateway™ U6 flanqueado por attL que contiene el casete de ARNi
• Todos los componentes necesarios para el envasado lentiviral y la administración eficaces del ARNhc de interés
• Marcador de selección de blasticidina para una selección rápida y eficaz de líneas celulares estables que expresan el ARNhc

Clonación, clonación Gateway, transfección plasmídica de ARNhc y ARNmi, ARNi, ARNi, investigación de epigenética y ARN no codificante, ARNi basado en virus