Invitrogen™ BaculoDirect™ C-Term Transfection Kit

• Diseñados para incluir sitios attR para una recombinación rápida y eficaz con el clon de entrada Gateway
• El gen de interés se recombina a partir del clon de entrada en el ADN lineal BaculoDirect mediante una sencilla reacción LR de una hora.
• La mezcla de reacción resultante contiene un gen portador de baculovirus recombinante de interés que se utiliza directamente para transfectar células de insecto.
• Elimina la necesidad de transformar bacterias y aislar bácmidos grandes o de cotransfectar el vector de transferencia y el ADN lineal del baculovirus en células de insecto, reduciendo en gran medida el tiempo de manipulación.
• El baculovirus purificado se puede aislar en menos de una semana.

• ADN lineal Gateway: Diseñado para la clonación rápida con el clon de entrada Gateway y la posterior expresión en células de insecto Sf9 o Sf21
• Promotor potente de poliedrina para una expresión de alto nivel
• Sitios R para una recombinación eficaz con un vector de entrada Gateway flanqueado por attL
• Gen TK para la selección negativa usando ganciclovir
• Etiqueta V5-His N-terminal para la detección con el anticuerpo anti-V5 Invitrogens y purificación con resina quelante de níquel (ADN lineal N-terminal BaculoDirect)
• Sitio de escisión de la proteasa de TEV para la eliminación de la etiqueta V5-His después de la purificación (ADN lineal N-terminal BaculoDirect)
• Etiqueta C-terminal V5-His para la detección con el anticuerpo anti-V5 Invitrogens y purificación con resina quelante de níquel (ADN lineal C-terminal BaculoDirect)

Producción y titulación de baculovirus, clonación, clonación Gateway, expresión en células de insecto, expresión de proteínas, proteínas, expresión, aislamiento y análisis