Molecular Probes™ Intracellular pH Calibration Buffer Kit

El kit de tampón de calibración de pH intracelular permite la medición del pH intracelular cuando se utiliza junto con los indicadores de pH intracelulares pHrodo™ Red AM, pHrodo™ Green AM o BCECF. Los pHrodo™ Red AM y pHrodo™ Green AM son levemente fluorescentes a pH neutro pero se vuelven cada vez más fluorescentes a medida que el pH desciende. La modificación de las coloraciones roja y verde de pHrodo™ con grupos de ésteres AM da como resultado una molécula sin carga que puede permear las membranas celulares. Una vez dentro de la célula, las esterasas no específicas escinden los grupos de bloqueo lipofílico, lo que resulta en un compuesto retenido dentro del espacio intracelular. Entonces, la intensidad de la fluorescencia de las sondas es un indicador del pH intracelular. El uso posterior del kit de tampón de calibración de pH intracelular permite medir el pH intracelular.

El kit de tampón de calibración de pH intracelular contiene un intervalo de tampones de calibración de pH (pH 4,5, 5,5, 6,5 y 7,5), así como valinomicina y nigericina, que ayudan a equilibrar el pH dentro y fuera de las células. Después de usar pHrodo™ Red AM o pHrodo™ Green AM y medir la intensidad de la fluorescencia en condiciones experimentales, las células se suspenden en uno de los tampones de calibración a los que se han añadido valinomicina y nigericina, y se mide de nuevo la intensidad de la fluorescencia. Esto se repite con los tampones de calibración restantes para poder crear una curva estándar y utilizarla para determinar el pH intracelular asociado a las condiciones experimentales.