Invitrogen™ GeneArt™ Seamless Cloning and Assembly Enzyme Mix

Descripción

La mezcla de enzimas y montaje y clonación GeneArt™ Seamless permite la clonación direccional y simultánea de entre 1 y 4 fragmentos de PCR en cualquier orden, en cualquier vector linealizado y en una sola reacción a temperatura ambiente de 30 minutos. La mezcla de enzimas GeneArt™ Seamless es la solución económica para crear construcciones de hasta 13 kb con opción de montaje de alto rendimiento.

• Eficacia: opción de clonación previa de fragmentos de gran tamaño para aumentar la eficacia de la clonación
• Velocidad y facilidad: clone fragmentos de ADN con la secuencia que desee en un único vector (hasta 13 kb); no requiere digestión de restricción, ligadura ni emplazamientos de recombinación
• Herramientas gratuitas: diseñe su construcción final y los oligonucleótidos de ADN en sílice con nuestra herramienta gratuita basada en la web que le guiará paso a paso por su proyecto
• Flexibilidad de vectores: utilice nuestro vector lineal o un vector de su elección

Para la clonación de elementos de ADN preexistentes demasiado largos para ser amplificados por PCR y para moléculas finales de hasta 40 Kb, considere el kit de clonación y ensamble GeneArt™ Seamless PLUS (1–4 fragmentos de ADN solamente); y para moléculas finales mayores de 110 Kb, considere el sistema de ensamble genético GeneArt™ High-Order.

Creación simple y rápida de clones
La clonación GeneArt™ Seamless es un proceso sencillo de dos pasos que consiste en un ensamble in vitro seguido de una transformación. La mezcla de enzimas utiliza una mezcla de enzima y tampón patentada para ensamblar fragmentos de ADN sin secuencias o marcas adicionales («seamless»). Si es necesario, se incorpora fácilmente una homología terminal mediante la amplificación de PCR con oligonucleótidos de ADN personalizados y diseñados con nuestra herramienta web gratuita.

Eficacia, flexibilidad y precisión de la clonación
El éxito de la clonación es independiente de la secuencia de inserción y el tipo de vector, lo que le permite diseñar y añadir casi cualquier secuencia deseada, o combinación de secuencias, a cualquier plásmido siempre y cuando pueda ser linealizada por la digestión de enzimas de restricción o PCR. Los clones circulares obtenidos de la reacción contienen solo la secuencia de su vector original, insertos y las homologías correspondientes originales, sin inserciones de nucleótidos extraños.

Soporte de diseño para clonación en sílice
Un paso clave en la clonación GeneArt™ Seamless es el diseño correcto de fragmentos y oligonucleótidos con la homología y el espaciado apropiados para ayudar a asegurar el ensamble exitoso de su clon. Para simplificar y acelerar el proceso de diseño, proporcionamos una herramienta en línea gratuita, la herramienta de diseño GeneArt™ para montaje y mutagénesis fluidos o de alto grado, para ayudarle a diseñar su experimento en sílice. La herramienta guía al usuario a través del diseño de construcción, incluyendo la importación, el orden y la orientación de los fragmentos; comprueba áreas de homología y posibles problemas de diseño; crea primers para la preclonación o incorpora homología terminal entre fragmentos, si es necesario; y genera archivos de mapa de construcción final y secuencia en formato Genbank para descargar o importar en el software Vector NTI™.

Aplicaciones
La mezcla de enzimas de clonación y ensamble GeneArt™ Seamless está diseñada para potenciar la clonación y el ensamble de ADN en una amplia gama de aplicaciones de biología molecular y biología sintética, entre otras. El producto permite la creación de vectores de expresión modulares, con piezas intercambiables, y se puede utilizar para realizar una variedad de tareas que de otro modo requerirían múltiples pasos. Utilice la mezcla para construir proteínas de fusión, eliminar, reemplazar o agregar elementos de ADN como sitios de restricción en un vector existente y realizar muchas otras técnicas que requieren la manipulación de secuencias genéticas.

Solo para uso en investigación. No diseñado para uso diagnóstico o terapéutico en humanos ni en animales.