Invitrogen™ Mezcla maestra GeneArt™ Gibson Assembly EX

La mezcla maestra GeneArt Gibson Assembly EX permite el ensamblaje de ADN a través de una técnica que permite que múltiples fragmentos de ADN superpuestos se puedan vincular sin problemas en una reacción optimizada de un solo tubo y dos pasos. Los fragmentos de ADN de diferentes longitudes se ensamblan de manera uniforme utilizando superposiciones complementarias entre fragmentos. La flexibilidad inherente y el éxito de este enfoque hace que sea adecuado para construcciones pequeñas y grandes de ADN, e incluye tanto inserciones simples como múltiples. Además, se ha utilizado para construir genomas enteros. Los productos resultantes pueden usarse para una variedad de aplicaciones posteriores, incluyendo la transformación, PCR y amplificación por círculo rodante (RCA). El kit de la mezcla maestra GeneArt Gibson Assembly EX incluye la mezcla maestra, el control positivo y el agua, y se adapta al uso de sus propias células competentes.

Las características de la mezcla maestra GeneArt Gibson Assembly EX incluyen:

• Simple: ensamble y clone hasta 15 fragmentos de ADN en una sola reacción
• Eficiente: la sólida eficiencia proporciona clones con éxito, tanto para construcciones simples como más desafiantes
• Flexible: las directrices de diseño permiten el ensamblaje en cualquier vector de su elección
• Práctica: disponible como kits de mezcla maestra y kits de clonación completos con células químicas o electrocompetentes
• Fiable: más de 4000 citas en publicaciones científicas que destacan su gran éxito

Ensamblaje perfecto de hasta 15 fragmentos

La clonación GeneArt Gibson Assembly EX es un proceso sólido, de un solo tubo y de dos pasos, por el que se combinan hasta 15 insertos y vectores en una mezcla enzimática exclusiva para ensamblar fragmentos de ADN con homología de terminaciones compartidas sin dejar secuencias adicionales ni cicatrices (sin problemas). Una vez finalizada esta reacción dualmente optimizada, una parte de la reacción de ensamblaje se transforma entonces en células químicamente competentes o electrocompetentes, lo que produce clones listos para su análisis al día siguiente. La homología de terminaciones de pares requerida de 20 a 40 bases está diseñada en el fragmento de novo para su síntesis o se puede crear con facilidad mediante la amplificación de PCR con oligonucleótidos de ADN personalizados. Esta mezcla de enzimas especiales crea una construcción de ADN unida sin problemas y covalente que proporciona una alta eficiencia.

Método sólido para una eficacia máxima

Debido al producto final unido covalentemente, el método GeneArt Gibson Assembly EX permite el uso de células químicamente competentes o células electrocompetentes para una mayor eficiencia de transformación, lo que es especialmente importante en construcciones más desafiantes. No hay necesidad de enzimas de restricción, ligación, o sitios de recombinación, y el método proporciona una construcción sin problemas ni bases adicionales no deseadas.

Ofrece una gran versatilidad

El método GeneArt Gibson Assembly EX proporciona versatilidad, puede optimizar muchas técnicas mediante una combinación, adición, eliminación o intercambio rápidos de segmentos de ADN, y elimina la necesidad de subclonar, lo que ahorra tiempo y esfuerzo en el flujo de trabajo de clonación.