Molecular Probes™ Fluo-4, AM, penetra en la célula

Los indicadores de calcio marcados son moléculas que presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca²⁺. Se ha utilizado Fluo-3 para crear una imagen de la dinámica espacial de la señalización de Ca²⁺ en experimentos de citometría de flujo que implicaban una fotoactivación de los quelantes atrapados, segundos mensajeros y neurotransmisores, y para el screening farmacológico basado en células. Fluo-4 es un análogo de fluo-3 con los dos sustituyentes de cloro reemplazados por flúor, lo que se traduce en un incremento de la excitación de fluorescencia a 488 nm y el consiguiente aumento de los niveles de la señal de fluorescencia. Las células se pueden cargar como éster AM de estos indicadores calcio mediante la adición del indicador disuelto directamente a las placas que contienen las células cultivadas. Estos indicadores son útiles para aplicaciones de detección de microplacas, fluorescencia y microscopía confocal y citometría de flujo.

Especificaciones del indicador de calcio (éster AM):
• Etiqueta (Ex/Em de forma unida a Ca²⁺): Fluo-4 (494/506 nm)
• Aumento de la intensidad de fluorescencia al unirse con Ca²⁺: >100 veces
• K_d para Ca²⁺ en tampón: ∼335 nM
• Presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca²⁺ con poco cambio en la longitud de onda

Uso de TPEN para controlar cationes de metales pesados
Además, los indicadores basados en BAPTA, como estos, se unen a varios cationes de metales pesados (por ejemplo, Mn²⁺, Zn²⁺, Pb²⁺) con mucha mayor afinidad que a Ca²⁺. Las perturbaciones en las mediciones de calcio causadas por la presencia de estos iones pueden controlarse usando el quelante seleccionador de metales pesados TPEN.(n.º de cat. T1210).

Más opciones para indicadores de calcio fluorescentes
Ofrecemos una amplia selección de indicadores de calcio Molecular Probes™ para su uso en diversos escenarios experimentales. Para obtener más información, consulte Fluorescent Ca²⁺ Indicators Excited with Visible Light—Section 19.3 (Indicadores de Ca2+ fluorescentes excitados mediante luz visible, sección 19.3) en el manual de Molecular Probes™.

Para obtener información sobre indicadores de Ca²⁺ excitables mediante UV, indicadores de Ca²⁺ basados en proteínas, conjugados de indicadores de Ca²⁺ e indicadores basados en fluorescencia de otros iones metálicos (es decir, Mg²⁺, Zn²⁺) consulte Indicators for Ca²⁺, Mg²⁺, Zn²⁺ and Other Metal Ions—Chapter 19 (Indicadores para Ca2+, Mg2+, Zn2+ y otros iones metálicos, capítulo 19) en el manual de Molecular Probes™

Recomendamos disolver en DMSO anhidro de alta calidad para concentraciones madre de 1 a 5 mM.