Thermo Scientific™ BseXI (BbvI) (3 U/μL)

5'...G C A G C (N)₈▵...3'

3'...C G T C G (N)₁₂▵...5'

Condiciones para una actividad del 100 %:

• 1 tampón BseXI: 50 mm de Tris-HCl (pH de 7,5 a 37 °C), 2 mm de MgCl₂, 100 mm de nacl y 0,1 mg/ml de BSA
• Incubar a 65 °C.
• Para garantizar una mayor eficacia de la digestión, realice la reacción de escisión con aceite de parafina

Tampón de almacenamiento:

• BseXI se suministra en: 10 mm de Tris-HCl (pH 7,4 a 25 °C), 200 mm de NaCl, 1 mm de DTT, 1 mm de EDTA, 0,2 mg/ml de BSA y 50 % (v/v) de glicerol

Ligadura y refragmentación:

• Tras una sobredigestión con 10 veces la cantidad recomendada de BseXI, más del 95 % de los fragmentos de ADN pueden ligarse y recortarse

Efectos de metilación:

• Dam: nunca se solapa, sin efecto.
• Dcm: nunca se solapa, sin efecto.
• CpG: puede solaparse, sin efecto.
• EcoKI: nunca se solapa, sin efecto.
• EcoBI: puede solaparse, efecto sin determinar.

Nota:

Analizado con pBR322 DNA (N.º SD0041). Con la incubación a 37 °C se obtiene una actividad del 10 %. Una sobredigestión con más de 40 veces la cantidad recomendada de BseXI puede provocar una actividad estrella (star activity). BseXI puede permanecer asociada al ADN fragmentado, lo que puede provocar un desplazamiento de las bandas de ADN durante la electroforesis. Para evitar patrones atípicos de las bandas de ADN, use colorante de carga de ADN 6X y solución SDS para la preparación de muestras o caliente el ADN digerido en presencia de SDS antes de la electroforesis.