MP Biomedicals™ Kit de detección de senescencia FastCellular™, SPiDER-ΒGal

La senescencia celular es un fenómeno por el cual las células normales dejan de dividirse y entran en un estado de detención irreversible del crecimiento. Es uno de los aspectos más fundamentales del comportamiento celular y generalmente se cree que está asociado con mecanismos supresores de tumores y que es una causa subyacente del envejecimiento. La Β-galactosidasa asociada a la senescencia (SA-Β-gal), que está sobreexpresada en las células senescentes, se ha utilizado ampliamente como marcador de la senescencia celular. Aunque X-gal es un reactivo muy conocido que se utiliza para detectar SA-Β-gal, tiene las siguientes desventajas: 1) requiere células fijadas debido a la mala permeabilidad celular, 2) tiene una capacidad cuantitativa baja debido a la dificultad de diferenciar visualmente las células teñidas frente a las no teñidas, y 3) requiere tiempos de tinción largos.

Para superar las desventajas inherentes al uso de X-gal, utilizamos un nuevo reactivo y método para la detección de la senescencia celular. SPiDER-ΒGal ofrece una mayor sensibilidad en la detección de SA-Β-gal debido a una mayor permeabilidad y retención celular dentro de las células. En comparación con el método X-gal, el kit de detección de senescencia FastCellular puede usarse tanto para células vivas como fijadas, porque proporcionamos Bafilomicina A1 para inhibir específicamente la actividad endógena de la Β-galactosidasa en las células vivas y así aumentar la especificidad de detección para las células vivas. Para las células fijadas, la SA-Β-gal es detectable mediante el uso de SPiDER-ΒGal y el tampón Mcllvaine (pH 6.0, consulte el protocolo para ensayos de células fijadas). Dado que SPiDER-ΒGal emite una fluorescencia fuerte y estable después de la reacción con SA-Β-gal, se puede aplicar al análisis cuantitativo mediante citometría de flujo. Además, el tiempo de tinción es de solo 30 minutos. El kit incluye una placa de 6 pocillos con 1 unidad de SPiDER-ΒGal y 1 unidad de Bafilomicina A1

Ventajas del uso del kit de detección de senescencia FastCellular:

• Mayor sensibilidad gracias a una nueva sonda de detección fluorogénica.
• Aplicable a células vivas y tejidos fijados.
• Capacidad para cuantificar SA-Β-gal en ensayos de senescencia celular.
• Tiempo de tinción corto (30 min)