Thermo Scientific™ Fosfatasa alcalina termosensible FastAP (1 U/μl)

Características destacadas

• Enzima recombinante
• Desfosforilación rápida: 10 minutos a 37 °C
• Inactivación rápida y completa: 5 minutos a 75 °C
• Digestión y desfosforilación simultáneas de ADN de vector
• 100 % activa en tampones de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y enzimas de restricción
• Un protocolo para todos los tipos de extremos de ADN:
  • 5’-protuberantes
  • 3’-protuberantes
  • extremos romos
  • nucleótidos únicos
• Limpieza de PCR junto con Exo I
• Desfosforilación de proteínas

Aplicaciones

• Desfosforilación del ADN del vector de clonación para evitar la recircularización durante la ligadura
• Digestión y desfosforilación simultáneas de ADN de vector
• Limpieza del producto de PCR: degradación de nucleótidos antes de secuenciación del producto de PCR
• Desfosforilación de ácido nucleico 5'-termini antes del etiquetado con polinucleótido quinasa T4
• Otras aplicaciones en las que es necesaria la desfosforilación de sustratos de ADN y ARN
• Desfosforilación de proteínas

Nota

• La unión de FastAP Thermosensitive Alkaline Phosphatase al ADN puede provocar un desplazamiento de bandas en geles de agarosa. Para evitarlo, incube las muestras con colorante de carga de ADN 6X y solución SDS a 65 °C durante 10 minutos y enfríelas con hielo antes de la electroforesis.
• FastAP Thermosensitive Alkaline Phosphatase está activa en todos los tampones de enzimas de restricción y pueden añadirse directamente al ADN digerido. No es necesaria la inactivación por calor de la enzima de restricción antes de la reacción de desfosforilación.