Ambion™ Mezcla de sustancia añadida de ARN de ERCC

La variación de datos en la expresión de ARN se puede atribuir a una serie de factores, incluida la calidad del material de partida, el nivel de celularidad y producción de ARN, la plataforma empleada y la persona que realiza en experimento. Para controlar estas fuentes de variabilidad, el Consorcio de Controles de ARN Externo (ERCC), un grupo ad hoc de organizaciones académicas, privadas y públicas auspiciado por el Instituto Nacional de Normas y Tecnología (NIST), ha desarrollado un conjunto común de controles de ARN externos. NIST ). Los controles constan de un conjunto de transcritos poliadenilados y sin marcar diseñados para añadir a los experimentos de análisis de ARN tras el aislamiento de la muestra para compararlas con un conjunto de criterios de rendimiento. Antes del diseño de estos controles universalmente aceptados resultaba difícil ejecutar una investigación exhaustiva de métricas fundamentales de rendimiento analítico. De la marca confiable de reactivos de ARN de calidad, Ambion™ Las mezclas de control Spike-In de ERCC son mezclas preformuladas de 92 transcripciones, derivadas y rastreables a partir de plásmidos de ADN certificados por el NIST, disponibles comercialmente. Las transcripciones están diseñadas para tener una longitud de 250 a 2000 nt, que imitan a los ARNm eucariotas naturales.

Características principales del producto:

Lograr una medida estándar para la comparación de datos entre experimentos de expresión genética

Medir la sensibilidad (límite inferior de detección) y el rango dinámico de un experimento

Cuantificar la expresión genética diferencial

Libere el potencial del análisis de ARN
El análisis de ARN, incluido el perfil de expresión genética y el estudio del transcriptoma completo, puede conducir a una mejor comprensión de los patrones de expresión en estados patológicos y proporciona mayores conocimientos sobre las vías biológicas y los mecanismos moleculares que regulan el destino celular, el desarrollo y la progresión de la enfermedad. Los métodos tradicionales para el análisis de ARN, como la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR) y los microarreglos, tienen una eficacia demostrada. En la actualidad, los sustituye la secuenciación de última generación, una alternativa digital de gran rendimiento. Debido a que cada método utiliza múltiples plataformas, y con la necesidad de comparar varias muestras a través de plataformas en todo el mundo, una medida estándar para la comparación de datos es necesaria. A medida que se amplían las capacidades del análisis de ARN, la necesidad de crear una vista estandarizada de los datos será aún más importante.

Obtenga y compare resultados con precisión confirmada
Ambion™ Los controles de adición de ARN ERCC se utilizan para crear una medición de referencia estándar de ARN tanto dentro de un experimento como en múltiples experimentos realizados utilizando varias muestras y plataformas. Gracias a las dos formulaciones de mezcla de sustancia añadida (figura 1), se pueden examinar varias mediciones, como la sensibilidad y el rango dinámico, para evaluar los distintos parámetros en un experimento o varios (figura 2). Además, las relaciones de cambio de expresión entre dos muestras se pueden calcular con un alto grado de confianza mediante la relación altamente concordante entre la sustancia añadida de ARN ExFold 1 y la sustancia añadida de ARN ExFold 2 (figura 3). Las mediciones se determinaron a través de concentraciones molares conocidas para cada transcripción dentro de spike-in mix y a través de asociación de las dos mezclas utilizando una combinación de relaciones a través de 4 subgrupos diferentes de los 92 transcritos. Los controles son ideales para experimentos de secuenciación de próxima generación, como en SOLiD™ Sistema y plataformas de microarrays compatibles, como el Illumina™ Sentrix™ Chip de cuentas.

Elija entre opciones flexibles para configuraciones del kit ERCC Ya
sea que mida el rango dinámico o el cambio de expresión genética, Ambion™ Las mezclas de control de adición ERCC están disponibles en dos configuraciones de kit para satisfacer sus necesidades experimentales. Utilice la mezcla de control de sustancia añadida de ERCC para determinar el rango dinámico y el límite inferior de detección de la plataforma. Utilice las mezclas de sustancias añadidas de ERCC ExFold para evaluar la precisión de las mediciones de expresión génica diferencial.

	Mezcla de adición de ARN ERCC 1*	Mezcla para pinchos ExFold 1*	Mezcla para pinchos ExFold Spike-In 2*	Agua libre de nucleasas
Mezcla de ARN de ERCC (n.° de cat. 4456740)	10 μlitros	—	—	1,75 mL
Mezclas de ARN enriquecido ExFold de ERCC (n.° de cat. 4456739)	—	10 μlitros	10 μlitros	1,75 mL

*Aunque ERCC RNA Spike-In Mix 1 y ExFold Spike-In Mix 1 contienen la misma formulación de transcripciones de ERCC, no sustituya ERCC RNA Spike-In Mix 1 por ExFold Spike-In Mix 1 para la evaluación del cambio de plegamiento. Utilice únicamente ExFold Spike-In Mix 1 y Mix 2 con el mismo número de lote de fabricación.

Sólo para uso en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.