Thermo Scientific™ Kit de clonación de PCR CloneJET™ con células competentes DH10B

• Este paquete incluye el CloneJET Kit de clonación por PCR (20 o 40 reacciones) y DH10B Células competentes que están optimizadas para su uso con el kit y que pueden transformarse directamente con el producto de ligadura

CloneJET Kit de clonación por PCR
Un sistema avanzado de selección positiva para la clonación de alta eficiencia de productos de PCR generados con cualquier ADN polimerasa termoestable. Se puede clonar cualquier fragmento de ADN con extremos cohesivos o romos. El kit funciona bien con fragmentos de ADN fosforilados y no fosforilados. La ligadura al vector de selección positiva incluido solo tarda unos 5 minutos y produce más del 99 % de clones recombinantes. Los productos de PCR con extremos romos generados con una enzima de corrección se ligan directamente al vector de clonación.

Los productos de PCR generados con ADN polimerasas no de corrección o con mezclas de ADN polimerasas se deben despuntar antes de la ligadura en una reacción de 5 minutos con la enzima de conversión en extremos romos del ADN termostable que se proporciona con el kit. DH10B Las células competentes están optimizadas para su uso con este kit y se pueden transformar directamente con el producto de ligadura.

Contiene el novedoso vector de clonación de selección listo para su uso pJET1.2/blunt. El vector contiene un gen enzimas de restricción letal que se interrumpe con la ligadura de un inserto de ADN en el sitio de clonación. Como resultado, solo las células bacterianas con plásmidos recombinantes pueden formar colonias. Las moléculas del vector pJET1.2/blunt que no disponen de insertos expresan una enzima de restricción letal, que mata la célula de E. coli huésped después de la transformación. Esta selección positiva acelera drásticamente el proceso de identificación de colonias y elimina los costes adicionales necesarios para la selección de color azul/blanco.

• Rápido: clonación de PCR en solo 5 minutos
• Máxima eficacia: 99 % de clones positivos
• Sin fondo de clonación: vector de selección positiva
• Versátil: idóneo para clonación de extremo romo o adherente
• Económico: evita los costes del cribaje de color azul/blanco

Aplicaciones:

• Clonación de productos de PCR de extremo romo o cola 3' dA de hasta 10 kb
• Clonación de fragmentos de ADN generados por enzimas de restricción
• Secuenciación del ADN clonado
• Transcripción in vitro e in vivo de insertos clonados del promotor T7

DH10B Células competentes
Células de E.coli químicamente competentes y de alta eficiencia. El DH10B es adecuada para la clonación de ADN que contiene metilcitosina y metiladenina, lo que permite clonar de manera eficiente tanto el ADN genómico procariota como el eucariota. Estas células son ideales para la construcción de bibliotecas de ADNc utilizando vectores derivados de plásmidos. Genotipo: F – mcrAΔ (mrr-hsdRMS-mcrBC)φ 80lacZΔ M15Δ lacX74 recA1 endA1 araD139Δ (ara-leu)7697 galU galKλ – rpsL(StrR) nupG.

• Alta eficiencia de transformación: > 1x109 ufc/μg de ADN de pUC19
• Adecuado para aplicaciones de clonación rutinarias y de alto rendimiento
• Cómodo envasado de dos reacciones por vial
• El medio de SOC Medio de crecimiento incluido