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Molecular Probes™ Kit de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647
Kit de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647
Marca: Molecular Probes™ C10424
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Descripción
El kit de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647 proporciona un ensayo simplificado y más sólido para analizar la replicación de ADN en las células proliferantes en comparación con los métodos de BrdU tradicionales. El ADN recién sintetizado se analiza mediante el láser de 633/5 nm del citómetro de flujo.Consulte la guía de selección de todos los ensayos Click-iT™ EdU y Click-iT™ Plus EdU para citometría de flujo.
Un método avanzado que ofrece resultados superiores a BrdU
El método más preciso de análisis de proliferación es la medición directa de la síntesis del ADN. Originalmente, este procedimiento se realizaba mediante la incorporación de nucleósidos radiactivos, es decir, 3H-timidina. Este método fue reemplazado por la detección basada en anticuerpos del análogo nucleósido bromodesoxiuridina (BrdU). Los kits de ensayo de citrometría de flujo Click-iT™ EdU son una novedosa alternativa al ensayo de BrdU. EdU (5-etinil-2´-desoxiuridina) es un análogo de la timidina que se incorpora al ADN durante la síntesis de ADN activa. La detección se basa en la química de clic: una reacción covalente catalizada con cobre entre una azida y un alqueno. En esta aplicación, el alqueno se encuentra en la fracción de etinil de EdU, mientras que la azida se acopla a los tintes Alexa Fluor™ 488, Alexa Fluor™ 647 o Pacific BlueTM. Se utilizan métodos de citometría de flujo estándar para determinar el porcentaje de células de fase S en la población (Fig. 1).
Unas condiciones moderadas permiten el uso con tintes de ciclo celular y anticuerpos
Las ventajas del etiquetado Click-iT™ EdU resultan fácilmente evidentes durante la realización del ensayo (Fig. 2). El pequeño tamaño de la azida del tinte permite la detección eficaz de los EdU incorporados utilizando condiciones moderadas, mientras que la fijación basada en aldehído estándar y la permeabilización de detergente son suficientes para que el reactivo de detección Click-iT™ obtenga acceso al ADN. Esto ocurre de manera diferente en los ensayos de BrdU donde se requiere la desnaturalización del ADN (mediante HCl, calor o digestión con ADNasa) para exponer la BrdU de forma que pueda detectarla un anticuerpo anti-BrdU. El procesamiento de las muestras para el ensayo de BrdU puede provocar una alteración de la señal de la distribución del ciclo celular, además de la destrucción de los sitios de reconocimiento de los antígenos cuando se utilice el método HCl. Por el contrario, el kit de proliferación de células EdU listo para su uso es compatible con tintes de ciclo celular. Este kit de ensayo EdU también puede multiplexarse con anticuerpos contra marcadores de superficie e intracelulares.
Protocolo rápido y sencillo
El protocolo Click-iT™ EdU se basa en los pasos de fijación mediante aldehído y permeabilización de detergente para etiquetado de anticuerpos inmunohistoquímicos, pero EdU es compatible con otros
agentes de fijación / permeabilización, incluyendo saponina y metanol. En tan solo cinco pasos podrá empezar a analizar sus datos de proliferación celular:
Consiga resultados exactos de manera económica
Al aumentar el número de ensayos por kit, el kit de ensayo de citometría de flujo Click-IT™ EdU Alexa Fluor™ 647 es más barato que los ensayos BrdU tradicionales, por lo que es la opción ideal para experimentos grandes.
Solo para uso en investigación. No diseñado para uso diagnóstico o terapéutico en humanos ni en animales.
Especificaciones
| Contiene EdU (5-etinil-2'-desoxiuridina), azida Alexa Fluor™ 647, dimetilsulfóxido anhidro (DMSO), fijador Click-iT™, tampón de permeabilidad y lavado Click-iT™ a base de saponina, sulfato de cobre (II) y aditivo tampón Click-iT™ EdU. |
|
| Citómetro de flujo | |
| Alexa Fluor™ 647 | |
| Tubo(s) | |
| Click-iT™ | |
| Temperatura ambiente |
| Fluorescente | |
| Kit de ensayo de citómetros de flujo | |
| 650⁄670 | |
| Menos peligroso | |
| 50 assays |
Seguridad y manipulación
Nombre del producto
Palabra de advertencia
Clasificación
Indicaciones de peligro
Consejos de prudencia
Otros peligros
- 647 Flow Cytometry Assay Kit
Palabra de advertencia
- Peligro
Clasificación
- PELIGRO ACUÁTICO A LARGO PLAZO Categoría 3
- Carcinogenicidad Categoría 1
- Lesión ocular grave/irritación ocular Categoría 1
- Mutagenicidad en células germinales Categoría 2
- Sensibilización cutánea Categoría 1
- Toxicidad específica en determinados órganos tras una exposición única Categoría 2
Indicaciones de peligro
- H317-Puede provocar una reacción alérgica en la piel.
- H318-Provoca lesiones oculares graves.
- H341-Se sospecha que provoca defectos genéticos.
- H350-Puede provocar cáncer.
- H371-Puede provocar daños en los órganos.
- H412-Nocivo para los organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos.
Consejos de prudencia
- P201-Pedir instrucciones especiales antes del uso.
- P261-Evitar respirar el polvo/el humo/el gas/la niebla/los vapores/el aerosol.
- P264-Lavarse concienzudamente tras la manipulación.
- P270-No comer, beber ni fumar durante su utilización.
- P280-Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de protección.
- P302+P352-EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con abundante agua/.
- P305+P351+P338-EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS: Aclarar cuidadosamente con agua durante varios minutos. Quitar las lentes de contacto, si lleva y resulta fácil. Seguir aclarando.
- P308+P313-EN CASO DE exposición manifiesta o presunta: Consultar a un médico.
- P310-Llamar inmediatamente a un CENTRO DE TOXICOLOG A/médico/.
- P332+P313-En caso de irritación cutánea: Consultar a un médico.
- P501b-Eliminar el contenido/el recipiente en conforme a la reglamentación local/regional/nacional/internacional.
Otros peligros
- MIXTURE LIST-Contém: Paraformaldehyde
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Título del producto
Molecular Probes™ Kit de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647 > 50 ensayos
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
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