Invitrogen™ Solución de estabilización RNAlater™

La solución de estabilización de ARN RNAlater estabiliza y protege el ARN celular en muestras de tejido intacto y descongelado, por lo que elimina la necesidad de procesar inmediatamente muestras de tejido o de congelar muestras en nitrógeno líquido para su posterior procesamiento. Se pueden recolectar y sumergir fragmentos de tejido en la solución de estabilización de ARN RNAlater para almacenarlos sin poner en riesgo la calidad o la cantidad de ARN obtenido tras el aislamiento posterior de ARN. Ventajas del uso de la solución de estabilización de ARN RNAlater:

• Efectividad: estabilice el ARN durante un día a 37 °C, una semana a 25 °C, un mes a 4 °C o indefinidamente a - 20 °C
• Simplicidad: un único reactivo que inactiva inmediatamente RNasas y estabiliza ARN dentro de tejidos o células
• Práctico: no es necesario congelar muestras en nitrógeno líquido o devolver con rapidez muestras al congelador de laboratorio
• Movilidad: perfecta para la recogida de tejidos in situ
• Versatilidad: compatible con muchos procedimientos de aislamiento de ARN, incluyendo la mayoría de los kits de aislamiento de ARN

Aplicaciones
La solución de estabilización de ARN RNAlater se ha probado en una variedad de tejidos de mamíferos, plantas, E. coli, Xenopus, peces y Drosophila. Es ideal para:

• Proteger la integridad del ARN en tejidos ricos en RNasas
• Recoger muestras de diferentes puntos temporales sin tener que procesar las muestras de cada punto inmediatamente
• Archivar tejidos para una futura microdisección
• Sumergir las cavidades u órganos animales para estabilizar el ARN durante largos procedimientos de disección
• Recoger muestras en ubicaciones (por ejemplo, hospitales, sitios de campo, transbordadores espaciales) donde no es posible realizar el aislamiento del ARN de forma inmediata
• Enviar muestras en hielo húmedo o incluso a temperatura ambiente si se envía durante la noche

Solución de estabilización de ARN RNAlater
El tejido diseccionado (menos de 0,5 cm en cualquier dimensión) simplemente se sumerge en unos cinco volúmenes de solución RNAlater a temperatura ambiente. La solución penetra en las células y estabiliza el ARN. Las muestras pueden almacenarse a - 20 °C de forma indefinida (el tejido no se congela), a 4 °C hasta un mes o a 25 °C durante una semana como máximo. Para el aislamiento de ARN, el tejido simplemente se retira de la solución RNAlater y se trata como si se acabara de recolectar. La mayoría de los tejidos pueden transferirse directamente a un tampón de lisis y homogeneizarse. Las muestras tratadas con la solución RNAlater y congeladas posteriormente se pueden triturar con un mortero y una mano de mortero, o bien pueden descongelarse y procesarse como tejido fresco sin tener que preocuparse por la ruptura celular y la liberación de ARNasa, puesto que esta ya se ha desactivado. Las celdas pueden escindirse y, a continuación, añadirse al tampón de lisis o, en algunos casos, se puede añadir la solución RNAlater junto con las células directamente al tampón de lisis.

Compatible con una amplia variedad de procedimientos
La solución de estabilización de ARN RNAlater es compatible con los métodos de aislamiento de ARN de un solo paso, como el reactivo TRIzol; con métodos de unión a vidrio como RNeasy de Qiagen o el kit Ambion RNAqueous; con métodos de extracción de fenol ácido como el kit Ambion ToTALLY RNA y con los métodos que utilizan la selección de oligo(dT) de ARNm, como el kit Ambion Poly(A)Purist. La investigación interna, así como la investigación independiente publicada recientemente, indican que el uso de la solución de estabilización de ARN RNAlater para el almacenamiento de tejido no afecta al resultado de posteriores experimentos de análisis de expresión de ARN en comparación con otros métodos de procesamiento.