Invitrogen™ Solución de transición de tejido congelado RNAlater™-ICE

Un reactivo nuevo para hacer pasar tejido congelado a un estado que permita una fácil extracción de ARN de alta calidad; los tejidos congelados sencillamente se sumergen en Ambion ARNlater-ICE y se dejan descongelar durante la noche a –20 °C. Se suministra en un frasco de 25 ml. Una vez descongelados, los tejidos se pueden procesar como tejidos frescos mediante procedimientos estándar de aislamiento de ARN. Ya no tendrá que moler el tejido congelado para proteger el ARN.

• Procese tejidos previamente congelados como muestras recién recogidas
• La descongelación de los tejidos en ARNlater-ICE protege el ARN de la degradación
• Ya no tendrá que pulverizar más tejido con mortero y maja ni realizar complicados trasvases de polvo a los tubos
• Reparta fácilmente muestras de tejido congelado para varios experimentos

La rápida congelación de los tejidos preserva el ARN
A menudo, los tejidos que se deben almacenar antes del aislamiento del ARN se congelan de manera forzada o rápida mediante hielo seco o nitrógeno líquido para preservar la integridad del ARN. El ARN en los tejidos permanece estable mientras esté congelado a –80 °C, pero la descongelación el tejido para la purificación de ARN puede provocar la degradación del ARN. Esto se cumple incluso cuando el tejido se descongela mientras está en la solución de desnaturalización.

Procesar tejidos congelados es complicado
Los tejidos congelados se suelen triturar con un mortero y una maja fríos para mantener la calidad del ARN. Hay que agregar nitrógeno líquido al mortero para mantener la muestra congelada mientras se tritura. El tejido triturado también se puede descongelar durante la transferencia a un recipiente de homogeneización. Esto a menudo resulta en la formación de grumos que no se deshacen fácilmente en la solución de lisis, lo que provoca la degradación y la pérdida de ARN.

Procesamiento de tejido congelado sin poner en peligro la integridad del ARN
RNAlater-ICE resuelve todos estos problemas. Basta con sumergir las muestras de tejido congelado en 10 volúmenes de la solución y almacenarlas toda la noche a –20 °C (la solución permanecerá líquida a esa temperatura). A medida que el tejido se descongela, se protege la integridad del ARN. Una vez tratado, el tejido se puede almacenar de manera segura a 4 °C o incluso a temperatura ambiente (durante un periodo de tiempo limitado) y se puede seguir diseccionando o procesando antes de su homogeneización en un tampón de lisis de aislamiento de ARN estándar. Por lo tanto, la misma muestra de tejido congelado se puede utilizar varias veces para diferentes experimentos sin poner en peligro la integridad del ARN.