Selección de citocinas para garantizar la consistencia: estudio de caso del FGF básico para su uso con células madre pluripotentes, desde la investigación hasta la fabricación.
Las citocinas, incluidos los factores de crecimiento, desempeñan un papel fundamental en la investigación con células madre, así como en el desarrollo y la fabricación de terapias celulares. Su función como moléculas de señalización intercelular e intracelular es fundamental para la expansión y diferenciación de una variedad de células madre e inmunitarias, como las células T, las células NK y las células madre derivadas de iPSC.
Los productos Gibco™ PeproTech™ incluyen una gama de proteínas recombinantes humanas entre las que elegir, que proporcionan un rendimiento constante, incluyendo bioactividad y pureza. Dependiendo de la aplicación de su laboratorio, puede seleccionar entre RUO (solo para uso en investigación) o AOF (sin origen animal) para fines de investigación y desarrollo, y pasar a considerar las citocinas GMP para la fabricación preclínica y clínica en la comercialización de terapias.
Estudio de caso del factor de crecimiento fibroblástico básico (FGF-b) para su uso con células madre pluripotentes inducidas (iPSCs)
Las células madre pluripotentes (PSCs) pueden autorrenovarse indefinidamente y conservar el potencial de diferenciarse en células de los tres linajes germinales: ectodermo, mesodermo y endodermo [1]. El uso de las PSC abarca desde la investigación básica hasta las aplicaciones clínicas y depende cada vez más de condiciones de cultivo sin suero y sin células alimentadoras, que a su vez dependen de una variedad de proteínas recombinantes. Es fundamental que estas proteínas funcionen de manera consistente a lo largo de todo el proceso, desde la investigación hasta el uso clínico, para ayudar a garantizar resultados fiables y reproducibles [2]. El factor de crecimiento fibroblástico básico (bFGF o FGF básico), también conocido como factor de crecimiento fibroblástico 2 (FGF2), es una de las proteínas recombinantes clave utilizadas en el cultivo de células madre. Desempeña un papel crucial en el mantenimiento de la pluripotencia y la autorrenovación mediante la activación de vías de señalización como PI3K/AKT, PLCγ y MEK/ERK [3,4].
Garantizar un rendimiento constante y de alta calidad del bFGF es esencial para obtener resultados fiables en los flujos de trabajo de cultivo de células madre, pero la falta de claridad sobre la equivalencia funcional de los diferentes grados de bFGF supone un reto para los investigadores que pasan de la investigación a las aplicaciones clínicas. Este estudio aborda esta laguna mediante la evaluación de tres productos de bFGF de PeproTech:
- RUO bFGF: Gibco™ Human FGF-Basic (FGF-2/bFGF) (154 aa) Recombinant Protein, PeproTech™ (Código de producto: 17851163)
- AOF bFGF: Gibco™ Human FGF-Basic (FGF-2/bFGF) (154 aa) Animal-Free Recombinant Protein, PeproTech™ (Código de producto: 17893543)
- PeproGMP bFGF: Gibco™ PeproGMP™ Human FGF-Basic (FGF-2/bFGF) Recombinant Protein, PeproTech™ (Código de producto: 30275723)
Aquí evaluamos y demostramos la consistencia de los tres grados de FGF-b midiendo su impacto en el crecimiento y la pluripotencia de las iPSC derivadas de fibroblastos dérmicos humanos. Estas células se expandieron primero durante múltiples pases en medio basal suplementado con uno de los tres grados de FGF-b, durante los cuales se observaron la tasa de crecimiento y la morfología (figura 1). Tras la expansión, se midió su expresión de marcadores de pluripotencia (figura 2).
La equivalencia funcional de los tres grados de FGF-b destaca su capacidad para integrarse en diversas etapas de la investigación con células madre, el desarrollo de procesos y la fabricación clínica. Este rendimiento constante de las proteínas recombinantes humanas de PeproTech permite una transición fluida entre grados sin necesidad de una revalidación sustancial, lo que ayuda a garantizar la eficiencia operativa y favorece flujos de trabajo rentables (Tabla 1).
Tabla 1. Características de los tres grados de citocinas de PeproTech.
Los productos Gibco™ PeproTech™ son fiables no solo para los grados bFGF, sino también para otras citocinas recombinantes y factores de crecimiento. Los productos PeproTech son reconocidos por su calidad, consistencia y fiabilidad, así como por su capacidad para respaldar la transición de RUO a GMP. Para obtener más información, visite la página de presentación de productos de PeproTech.
Referencias
- Melton D (2014) ‘Stemness’: definitions, criteria, and standards. Essentials of Stem Cell Biology. Academic Press. 7–17.
- Kirkeby A, Main H, Carpenter M (2025) Pluripotent stem-cell-derived therapies in clinical trial: a 2025 update. Cell Stem Cell 32(1):10-37.
- Nakashima Y, Omasa T (2016) What kind of signaling maintains pluripotency and viability in human-induced pluripotent stem cells cultured on laminin-511 with serum-free medium? BioResearch Open Access 5(1):84–93.
- Mossahebi-Mohammadi M et al. (2020) FGF signaling pathway: a key regulator of stem cell pluripotency. Front Cell Develop Biol 8:79.
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