Una de las herramientas más utilizadas en un laboratorio típico es la pipeta de desplazamiento de aire o de cojín de aire. Convenientes y fáciles de usar, pueden equiparse con puntas de pipeta desechables para minimizar el riesgo de contaminación cruzada entre muestras.
¿Sabe cómo seleccionar la pipeta del tamaño correcto para obtener la máxima precisión? Primero, veamos la mecánica.
Las pipetas de desplazamiento de aire se basan en un concepto simple:
Un pistón de diámetro constante se desplaza a través de un sello para mover una columna de aire. El movimiento del aire, a su vez, desplaza los líquidos hacia dentro y fuera de una punta de pipeta desechable.
Existe un cojín de aire dentro de la punta de la pipeta entre el líquido y el extremo de la pipeta, el líquido nunca entra en contacto con la pipeta en sí.
Después de colocar la punta de la pipeta, el pistón se mueve desde su posición de reposo a través del sello del pistón para expulsar aire de la punta.
La punta se sumerge justo debajo de la superficie del líquido a aspirar y el pistón con acción de resorte vuelve a su posición de reposo, creando un vacío que llena la punta con líquido.
Las pipetas de volumen ajustable utilizan un mecanismo de tornillo para cambiar la longitud del recorrido y fijar el volumen al 50% de la capacidad nominal.
Para pipetas con volúmenes nominales de 100 µL o mayores, la inexactitud de una pipeta de desplazamiento de aire se considera como un volumen constante a lo largo del rango de la pipeta. La ISO 8655 Parte 2 indica este valor como ≤ ±0,8 % de la capacidad nominal (es decir, ≤ ±0,8 µL para una pipeta de 100 µL) y depende principalmente de la mecánica de la pipeta. Para volúmenes menores, la inexactitud aumenta debido a la compresibilidad del aire y otros factores.
Normalmente, las hojas de datos o catálogos de pipetas presentan la precisión como un porcentaje del volumen nominal, a menudo sin información adicional, por lo que el usuario debe interpretar las implicaciones. Al estimar el porcentaje de precisión para volúmenes parciales, el numerador (la cantidad de inexactitud) permanece igual, mientras que el denominador (el volumen seleccionado) cambia.
Precisión de volúmenes parciales para una pipeta de 100 µL
| Volume Setting | Percentage of Nominal Capacity | Volume of Inaccuracy | Pipetted Volume Accuracy |
|---|---|---|---|
| 100 µL | 100% | ≤± 0.8 µL | ≤± 0.8% |
| 75 µL | 75% | ≤± 0.8 µL | ≤± 1.1% |
| 50 µL | 50% | ≤± 0.8 µL | ≤± 1.6% |
| 20 µL | 20% | ≤± 0.8 µL | ≤± 4% |
| 10 µL | 10% | ≤± 0.8 µL | ≤± 8% |
Está claro que una pipeta de desplazamiento de aire es más precisa cuando se utiliza a su capacidad nominal o cerca de ella. Además, la precisión disminuye significativamente cuando el volumen seleccionado es inferior al 50% de la capacidad nominal. Por ello, la mayoría de las pipetas indican un rango de volumen con límites superiores e inferiores.
La cantidad de líquido a pipetear a menudo se encuentra dentro del rango de varias pipetas diferentes. Por ejemplo, 20 µL podrían medirse con pipetas de 2 a 20 µL, de 5 a 50 µL o de 10 a 100 µL. El volumen se pipetearía con mayor precisión usando la pipeta de 2 a 20 µL. Si ese tamaño no está disponible, elija la pipeta con la capacidad más cercana al volumen que necesita. En este caso, la pipeta de 5 a 50 µL es mejor opción que la que mide de 10 a 100 µL.
Si su laboratorio dispone de pipetas con rangos apenas superpuestos, la adición de una o dos pipetas más con mayor superposición puede aumentar la precisión de sus mediciones.
La BRAND Transferpette S es una pipeta manual de un solo canal disponible en diez tamaños de volumen ajustable diferentes (de 0,1 a 1 µL hasta 1 a 10 mL), estos tamaños cubren casi todo el rango de 0,5 µL a 10 mL, superponiéndose con las mitades superiores de los rangos de pipeteo. De manera similar, las pipetas manuales Transferpette de 8 y 12 canales están disponibles en cinco rangos de volumen ajustables (de 0,5 a 10 µL hasta 30 a 300 µL) para volúmenes de muestra de 1 a 300 µL.
La BRAND Transferpette también está disponible en versión electrónica con opciones similares. Cinco pipetas electrónicas de un solo canal Transferpette cubren rangos de volumen de 0,5 a 10 µL hasta 250 µL a 5 mL, cinco modelos multicanal cubren volúmenes de 0,5 a 10 µL hasta 15 a 300 µL.
NOTA: En la mayoría de la literatura, se utiliza el término “precisión” para denotar la cantidad de inexactitud. Para mantener la coherencia con otras publicaciones, en este artículo usamos “precisión” al referirnos a porcentajes.
