Invitrogen™ Kit de ensayo de coactivadores de TR-FRET RAR beta LanthaScreen™, cabra

Descripción

Este kit contiene anticuerpo de cabra Tb-anti-GST; los demás componentes del kit son los mismos que los del kit A15137:

El kit de ensayo de coactivadores de TR-FRET RAR (receptor de ácido retinoico) beta LanthaScreen™ proporciona un método sensible y sólido para la detección de alto rendimiento de los posibles ligandos del RAR beta como agonistas de reclutamiento del coactivador dependiente de ligando. El kit utiliza un anticuerpo anti-GST marcado con terbio (Tb), un péptido coactivador marcado con fluoresceína y un dominio de unión a ligando del RAR (RAR-LBD) marcado con una etiqueta glutatión-S-transferasa (GST), en un formato de ensayo homogéneo para «mezclar y leer».

Cuando se realiza el ensayo de coactivadores de TR-FRET RAR beta LanthaScreen™ en modo agonista para identificar compuestos agonistas, se añade RAR beta-LBD a los compuestos problema ligandos, seguido de la adición de una mezcla de fluoresceína-péptido coactivador y anticuerpo anti-GST marcado con Tb. Después de un periodo de incubación a temperatura ambiente, se calcula la relación 520 nm/495 nm de TR-FRET y se puede utilizar para determinar la EC₅₀ a partir de una curva de dosis-respuesta del compuesto. Basado en la biología de la interacción de RAR beta-péptido coactivador, esta EC₅₀ del ligando es un valor compuesto que representa la cantidad de ligando necesaria para unirse al receptor, efectuar un cambio conformacional y reclutar el péptido coactivador (figura 1).

Contenido y almacenamiento:
El kit de ensayo de coactivadores de TR-FRET RAR beta LanthaScreen™ contiene proteína RAR beta-LBD (GST), péptido coactivador SRC2-2 marcado con fluorescencia, anticuerpo anti-GST marcado con Tb y tampones. Almacene los componentes como se indica en el protocolo del ensayo (- 80 °C, - 20 °C o + 4 °C).