Invitrogen™ LanthaScreen™ TR-FRET ERR alpha Coactivator Assay Kit, goat

Descripción

Este kit contiene anticuerpo Tb-anti-GST de cabra; los otros componentes del kit son los mismos que los del kit A15130:

El ensayo del coactivador de ERR (receptor relacionado con estrógeno) alfa LanthaScreen™ TR-FRET proporciona un método sensible y sólido para la detección de alto rendimiento de los potenciales ligandos de ERR alfa como agonistas inversos (a veces denominados antagonistas) del desplazamiento de coactivadores. El kit utiliza un anticuerpo anti-GST marcado con terbio (Tb), un péptido coactivador marcado con fluoresceína y un dominio de unión a ligando de ERR alfa (ERR alfa-LBD) que se etiqueta con glutatión-S-transferasa (GST) en un formato de ensayo homogéneo de mezcla y lectura.


En el ensayo del coactivador de ERR alfa LanthaScreen™ TR-FRET, se añade ERR alfa-LBD a los compuestos de ensayo de ligando, seguido de la adición de una mezcla de péptido coactivador de fluoresceína y anticuerpo anti-GST marcado con Tb. Después de un periodo de incubación a temperatura ambiente, se calcula la relación TR-FRET de 520 Nm/495 Nm y se puede utilizar para determinar la EC₅₀ a partir de una curva dosis-respuesta del compuesto. Basado en la biología de la interacción del péptido coactivador de ERR alfa, este ligando EC₅₀ es un valor compuesto que representa la cantidad de ligando necesaria para unirse al receptor, efectuar un cambio conformacional y desplazar el péptido coactivador (figura 1).


Contenido y almacenamiento:

El kit de ensayo del coactivador de ERR alfa LanthaScreen™ TR-FRET contiene proteína ERR alfa-LBD (GST), péptido coactivador PGC1a marcado con fluorescencia, anticuerpo anti-GST marcado con Tb y tampones. Almacene los componentes como se indica en el protocolo del ensayo (-80 °C, -20 °C o +4 °C).