Thermo Scientific™ Cfr9I (XmaI) (10 U/μl)

Descripción

Las endonucleasas de restricción convencionales representan una gran colección de enzimas de restricción de alta calidad, optimizadas para funcionar en uno de los tampones del sistema de cinco tampones. Además, se proporciona el tampón universal Tango para mayor comodidad en digestiones dobles. Todas las enzimas muestran una actividad del 100 % en las condiciones de reacción y tampón recomendadas. Para garantizar uniformidad en el rendimiento, los tampones de enzimas de restricción Thermo Scientific contienen BSA previamente mezclada, lo que mejora la estabilidad de numerosas enzimas y fija sustancias contaminantes que pueden estar presentes en preparaciones de ADN.

5'...C▵C C G G G...3'

3'...G G G C C▵C...5'

Condiciones para una actividad del 100 %:

• 1 tampón Cfr9I: 10 mM de Tris-HCl (pH 7,2 a 37 °C), 5 mM de MgCl₂, 200 mM de glutamato sódico y 0,1 mg/ml de BSA
• Incubar a 37 °C.

Tampón de almacenamiento:

• Cfr9I se suministra en: 10 mm de Tris-HCl (pH 7,5 a 25 °C), 250 mm de KCl, 1 mm de DTT, 0,1 mm de EDTA, 0,2 mg/ml de BSA y 50 % (v/v) de glicerol

Ligadura y refragmentación:

• Tras una sobredigestión con 50 veces la cantidad recomendada de Cfr9I, más del 95 % de los fragmentos de ADN pueden ligarse y recortarse

Efectos de metilación:

• Dam: nunca se solapa, sin efecto.
• Dcm: nunca se solapa, sin efecto.
• CPG: se solapa por completo, reducción de fragmentación
• EcoKI: nunca se solapa, sin efecto.
• EcoBI: nunca se solapa, sin efecto.

Digestión del ADN integrado en agarosa:

• Se requieren como mínimo 5 u de la enzima para la digestión completa de 1 μg de ADN lambda integrado en agarosa en 16 horas

Nota:

Para lograr una digestión completa del sustrato con Cfr9I, la concentración de ADN no debe ser menor de 50 μg/ml en el tampón de reacción.