Thermo Scientific™ Bpu1102I (BlpI) (10 U/μL)

Descripción

Las endonucleasas de restricción convencionales representan una gran colección de enzimas de restricción de alta calidad, optimizadas para funcionar en uno de los tampones del sistema de cinco tampones. Además, se proporciona el tampón universal Tango para mayor comodidad en digestiones dobles. Todas las enzimas muestran una actividad del 100 % en las condiciones de reacción y tampón recomendadas. Para garantizar uniformidad en el rendimiento, los tampones de enzimas de restricción Thermo Scientific contienen BSA previamente mezclada, lo que mejora la estabilidad de numerosas enzimas y fija sustancias contaminantes que pueden estar presentes en preparaciones de ADN.

5'...G C▵T N A G C...3'

3'...C G A N T▵C G...5'

Condiciones para una actividad del 100 %:

• 1 tampón Tango™: 33 mM de Tris-acetato (pH 7,9 a 37 °C), 10 mM de Mg-acetato, 66 mM de K-acetato y 0,1 mg/ml de BSA
• Incubar a 37 °C.

Tampón de almacenamiento:

• Bpu1102I se suministra en: 10 mM de Tris-HCl (pH 7,4 a 25 °C), 100 mM de KCl, 1 mM de DTT, 1 mM de EDTA, 0,2 mg/ml de BSA y 50 % (v/v) de glicerol
•  

Ligadura y refragmentación:

• Tras una sobredigestión con 50 veces la cantidad recomendada de Bpu1102I, más del 80 % de los fragmentos de ADN pueden ligarse en una mezcla de reacción con 20-40 u de ligasa de ADN T4/1 μg de fragmentos y 10 % de PEG. Más del 95 % de estos se pueden recortar

Efectos de metilación:

• Dam: nunca se solapa, sin efecto.
• Dcm: nunca se solapa, sin efecto.
• CpG: puede solaparse — sin efecto.
• EcoKI: nunca se solapa — sin efecto.
• EcoBI: puede solaparse, efecto sin determinar.

Digestión del ADN integrado en agarosa:

• Se requieren como mínimo 5 unidades de la enzima para la digestión completa de 1 μg de ADN lambda integrado en agarosa en 16 horas
• Extremos compatibles: Bpu10I, Eco81I, HpyF3I